优化脂肪间充质干细胞外泌体提取方法的研究  

Study on exosome extraction method of optimized ADS

作　　者：韩悦 耿承奎[2] 张鑫瑞 雷蕾 刘建宇 CHAN Yue;GENG Chengkui;ZHANG Xinrui

机构地区：[1]云南中医药大学,云南昆明650000 [2]昆明医科大学附属医院延安医院骨科,云南昆明650000

出　　处：《云南医药》2023年第3期96-99,共4页Medicine and Pharmacy of Yunnan

基　　金：昆明市卫生健康委员会卫生科研课题项目(2020-04-09-001)。

摘　　要：目的本研究旨在探讨用外泌体提取试剂盒提取脂肪间充质干细胞源性外泌体的优化方法。方法采用组织块贴壁法分离提取和培养原代脂肪间充质干细胞。收集1000mL 3~6代脂肪间充质干细胞的细胞上清,用100KD超滤离心管进行浓缩,外泌体提取试剂盒提取外泌体,测定外泌体悬液蛋白浓度后进行鉴定。结果脂肪间充质干细胞的形态主要以长梭形为主;外泌体悬液的蛋白浓度,经BCA法测定为7.66 mg/mL;透射电镜、NTA、蛋白质印迹法结果均符合外泌体的典型特征。结论在使用外泌体提取试剂盒(invitrogen)之前,用100KD的超滤管对1000mL细胞上清进行浓缩的方法可以成功提取到外泌体,而且是一种有效节省外泌体提取试剂盒剂量的方法。

关 键 词：脂肪间充质干细胞 外泌体 提取 鉴定 

分 类 号：R329.2[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]