鸡toll样受体7的克隆表达及多克隆抗体的制备  

作　　者：孟巍 郑世民[2] 杨桂君[2] 张瑞莉[2] 

机构地区：[1]山东省枣庄市市中区行政审批服务局,山东枣庄277100 [2]东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨

出　　处：《山东畜牧兽医》2023年第7期16-18,共3页Shandong Journal of Animal Science and Veterinary Medicine

基　　金：国家自然科学基金项目(30972162)。

摘　　要：本试验旨在制备兔抗鸡toll样受体7(chicken toll-like receptor 7, chTLR7)多克隆抗体,根据GenBank已发表的chTLR7序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增chTLR7胞外区基因片段,并构建原核表达重组质粒,通过优化蛋白表达条件,用获得的融合蛋白免疫兔制备多克隆抗体,通过免疫印迹及间接免疫荧光试验鉴定制备的兔抗chTLR7多克隆抗体的特异性。结果显示,该片段长度为1 122 bp,与预测的片段大小、碱基序列一致。构建的原核表达重组质粒pGEX-6P-1-chTLR7经IPTG诱导后,表达出预期63 kDa的重组蛋白,免疫兔可产生特异性抗体。制备的兔抗chTLR7多克隆抗体具有良好的特异性,为后续实验研究chTLR7传导通路、免疫机制等相关研究提供有利工具。

关 键 词：鸡toll样受体7 胞外区 原核表达 多克隆抗体 

分 类 号：S859.797[农业科学—临床兽医学]