利拉鲁肽对高糖介导人牙周膜成纤维细胞的影响  

作　　者：赵东强 林仰东[2] 

机构地区：[1]天津市泰达医院口腔科,天津300457 [2]天津市第一中心医院口腔科

出　　处：《中国老年学杂志》2023年第14期3550-3554,共5页Chinese Journal of Gerontology

摘　　要：目的研究利拉鲁肽(Lira)对高糖介导人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)凋亡及Wnt/连环蛋白β(CTNNB)1通路的影响及机制。方法体外复苏培养hPDLFs,取对数生长期的hPDLFs调整其密度为5×10^(8)个/L。对照组hPDLFs在常规培养基中培养〔含11 mmol/L葡萄糖(GLU)〕,甘露醇组hPDLFs在含有19.5 mmol/L甘露醇培养基中培养,高糖组在含40 mmol/L GLU的培养基中培养,Lira组在含有40 mmol/L GLU和100 nmol/ml Lira的培养基中培养。3 d后利用CCK-8法检测各组细胞活力,利用Hoechst染色检测细胞凋亡情况同时利用比色法检测各组hPDLFs凋亡相关指标含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3、6、9活性,检测各组hPDLFs内游离Ca^(2+)浓度,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测测各组hPDLFs上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-3和MMP-9表达,采用实时荧光定量PCR及Western印迹检测各组hPDLFs中Wnt3a、CTNNB1、Bcl2相关X蛋白(Bax)、重组人B细胞淋巴瘤因子2XL(Bcl-xl)的mRNA和蛋白表达。结果与对照组和甘露醇组比较,高糖组hPDLFs凋亡率及细胞内游离Ca^(2+)浓度显著增加,细胞活力显著降低(P<0.05),Caspase3、6、9活性和细胞上清液中MMP-2、MMP-3和MMP-9浓度显著升高(P<0.05),Wnt3a、CTNNB1及Bax mRNA和蛋白水平均表达显著升高,Bcl-xl mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05)。与高糖组比较,Lira组hPDLFs凋亡细胞数目显著减少,细胞内游离Ca^(2+)浓度显著降低,细胞活力显著升高(P<0.05),Caspase3、6、9活性显著降低,细胞上清液中MMP-2、MMP-3和MMP-9浓度显著降低(P<0.05),Wnt3a、CTNNB1及Bax mRNA和蛋白表达显著降低,Bcl-xl mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论Lira对高糖介导的hPDLFs损伤具有保护作用,降低细胞凋亡率,促进细胞增殖,其机制可能通过抑制Wnt/CTNNB1通路激活,抑制下游靶基因Bax,促进Bcl-xl的表达实现的,并且抑制细胞Caspase活性及上清液中MMP相关蛋白的释放。

关 键 词：利拉鲁肽 人牙周膜成纤维细胞 高糖 凋亡 Wnt/连环蛋白β(CTNNB)1通路 

分 类 号：R329.2[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]