蝴蝶兰建兰花叶病毒和齿兰环斑病毒的实时荧光定量PCR检测  

Real-time fluorescence quantitative PCR detection of cymbidium mosaic virus and odontoglossum ringspot virus in Phalaenopsis

作　　者：宋起萱 浦艳飞 余蓉培[2,3] 瞿素萍 杨春梅[2,3] 吴丽芳 汪国鲜[2,3] 阮继伟 Song Qixuan

机构地区：[1]云南大学资源植物研究院,云南昆明650504 [2]云南省农业科学院花卉研究所/国家观赏园艺工程技术研究中心,云南昆明650205 [3]玉溪云星生物科技有限公司,云南玉溪653100

出　　处：《江苏农业科学》2023年第15期21-28,共8页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：云南省重大科技专项计划(编号:202102AE090052);云南大学专业学位研究生实践创新基金(编号:ZC-22222419)。

摘　　要：建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,简称CymMV)和齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,简称ORSV)是蝴蝶兰生产中的主要病毒病害,建立稳定、灵敏的检测体系是进行病毒早期检测和脱毒技术研究的前提。本研究首先对CymMV和ORSV的外壳蛋白(coat protein,简称CP)基因片段进行克隆和序列比对,随后设计特异性引物,分别构建2种病毒的RT-qPCR(real time quantitative PCR,简称RT-qPC)检测体系,并对云南地区20份样品进行检测。研究结果显示,CymMV和ORSV CP基因序列与其他地区分离物中这2种病毒的核苷酸序列相似性分别为97.92%~98.66%和99.12%~99.56%,其CP基因序列具有保守性。CymMV和ORSV在RT-qPCR体系中最低检出浓度分别为30.9、35.0 copies/μL,灵敏度较RT-PCR(reverse transcription polymerase chain reaction,简称RT-PCR)提高10倍。利用RT-qPCR体系对20份温室样品进行检测,CymMV阳性率为100%,ORSV阳性率为90%,阳性率均高于RT-PCR检测结果。本研究构建的CymMV和ORSV RT-qPCR检测体系将为蝴蝶兰病毒病早期监测和脱毒种苗的培育奠定基础。

关 键 词：蝴蝶兰 建兰花叶病毒 齿兰环斑病毒 实时荧光定量PCR 病毒检测 

分 类 号：S436.81[农业科学—农业昆虫与害虫防治]