重铬酸钾对基于DNA提取鉴定粪样中布氏和毒害艾美耳球虫感染类型影响的研究  

作　　者：郭海婷 谭洁[1] 林瑞庆[2] 徐前明[3] 梁雪 李中原 

机构地区：[1]桂林医学院基础医学院、广西脑与认知神经科学重点实验室,广西桂林541199 [2]华南农业大学兽医学院,广东广州510642 [3]安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥230036

出　　处：《广西畜牧兽医》2023年第5期193-197,共5页Guangxi Journal of Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：广西自然科学基金项目(2019GXNSFBA 185031);广西研究生教育创新计划项目(JGY2022198);广西高等学校千名中青年骨干教师培育计划第4期资助项目(2020-58)。

摘　　要：为探究重铬酸钾(PD)对基于DNA提取鉴定粪便样品中鸡球虫感染类型结果的影响,将2.5%PD暂存的新鲜鸡粪样品随机分成4组,分别用3 mL PD、2 mL PD和1 mL ddH_(2)O、1 mL PD和2 mL ddH_(2)O、3 mL ddH_(2)O,以1 mL/次,先PD后ddH_(2)O的方法对鸡粪样品进行洗涤。洗涤结束后取上清液,测OD_(490)值;重悬沉淀,取200μL/管提取DNA,进行PCR扩增及其产物的琼脂糖凝胶电泳检测,同设阳性、空白对照和不同循环数对照。用超微量核酸蛋白浓度测定仪检测PCR产物浓度并进行统计学分析。结果表明:随ddH_(2)O洗涤次数增多,所得上清的OD_(490)值逐步降低,洗涤2次时,与ddH_(2)O对照组间差异不明显;对提取所得的DNA进行PCR扩增时,分别得到片段大小约为601 bp和702 bp的条带,空白对照组无此条带,且所用Nec-F/R引物的扩增较Bru-F/R引物的特异性高,36个循环数较30个和33个循环的电泳效果好,且所得PCR产物浓度间均差异不明显。结果表明,PD对基于DNA提取鉴定粪样中布氏艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫两种鸡球虫感染类型的结果无明显影响,可用于流行病学调查样品采集。

关 键 词：鸡球虫 重铬酸钾 DNA提取 感染 鉴定 

分 类 号：S858.315.9[农业科学—临床兽医学]