温肾通络止痛方调控巨噬细胞极化对破骨细胞分化的影响  

作　　者：韩秋革 郭杨[2] 马勇[1,2] 王礼宁 潘娅岚 刘孟敏 余自层 孙杰[2] 员浬 

机构地区：[1]南京中医药大学中医学院·中西医结合学院,江苏南京210023 [2]南京中医药大学骨伤修复与重建新技术实验室,江苏南京210023 [3]南京中医药大学护理学院,江苏南京210023

出　　处：《时珍国医国药》2023年第6期1294-1297,共4页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：国家自然科学基金面上项目(82074458,82174411);江苏省自然科学基金面上项目(BK20221351);江苏高校中西医临床医学品牌专业建设工程资助项目(2020PPZXL261);江苏省科研与实践创新计划项目(KYCX22_1882,KYCX22_1883)。

摘　　要：目的观察温肾通络止痛方对巨噬细胞极化的作用,探讨其对破骨细胞分化的影响。方法利用脂多糖建立炎性巨噬细胞模型,小鼠骨髓单核细胞体外建立破骨细胞诱导模型。通过CCK8法检测不同浓度温肾通络止痛方冻干粉对巨噬细胞增殖的影响。将实验分为正常组、模型组、中药组,通过ELISA检测巨噬细胞培养基上清中IL-6、TNF-α、TGF-β、IL-10的表达,利用蛋白免疫印迹法检测NF-κB信号通路相关蛋白及INOS、TNF-α蛋白的表达。采用TRAP染色及F-actin免疫荧光检测温肾通络止痛方对破骨细胞分化的影响。结果CCK8结果显示温肾通络止痛方冻干粉48h 125μg/mL对巨噬细胞的增殖效果最好(P<0.01)。酶联免疫法检测结果表明,与正常组比较,模型组巨噬细胞上清液中IL-6、TNF-α的表达升高,IL-10、TGF-β的表达降低;经温肾通络止痛方干预后IL-6、TNF-α的表达降低,IL-10、TGF-β的表达升高,且各组间差异具有统计学意义(P<0.01)。蛋白免疫印迹法结果表明,与正常组比较,模型组中p-p65/p65、TNF-α、INOS蛋白表达升高(P<0.01),IκBα的表达降低(P<0.01),与模型组比较,中药组中p-p65/p65、TNFα(P<0.01)、INOS(P<0.01)的蛋白表达降低,IκBα的表达升高(P<0.05)。TRAP和F-actin检测结果显示,各中药组均能减少破骨细胞数目,减小F-actin环面积,并减少环的数目,且各组之间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论温肾通络止痛方可能通过抑制NF-κB信号通路的相关蛋白的表达,抑制巨噬细胞M1极化,从而抑制破骨细胞的分化。

关 键 词：温肾通络止痛方 骨质疏松症 巨噬细胞极化 破骨细胞分化 NF-ΚB信号通路 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]