猪巴氏杆菌和波氏杆菌双重PCR检测方法的建立  

Development of a duplex PCR for detection of Pasteurella and Bordetella bronchiseptica in swine

作　　者：徐翔飞 黄盼 崔雪梅 黄叶娥 季权安[2] 韦强[2] 李科[2] 宋厚辉 鲍国连 刘燕[2] XU Xiangfei;HUANG Pan;CUI Xuemei

机构地区：[1]浙江农林大学动物科技学院动物医学院,浙江杭州311300 [2]浙江省农业科学院畜牧兽医研究所,浙江杭州310021

出　　处：《浙江农业科学》2023年第10期2533-2539,共7页Journal of Zhejiang Agricultural Sciences

基　　金：浙江省重点研发计划项目(2021C02007)。

摘　　要：本文旨在建立一种针对猪巴氏杆菌和波氏杆菌的特异、高效的双重PCR检测方法并应用于临床样品检测。根据巴氏杆菌和波氏杆菌保守序列16S rRNA基因为靶基因,应用Primer 3.0 Plus软件设计了2对引物,在此基础上建立并优化双重PCR反应体系。结果显示,该双重PCR检测方法能有效扩增出猪巴氏杆菌和波氏杆菌的172和519 bp的特异性片段,PCR扩增产物测序结果为目标片段;对副猪嗜血杆菌、产气荚膜梭菌、大肠埃希菌、沙门氏菌、链球菌的扩增结果均为阴性。将该方法应用于临床样品检测,对63例呼吸道症状的病猪的鼻拭子和肺脏进行细菌分离,其中10份样品检测出巴氏杆菌,8份样品检测出波氏杆菌,2份为巴氏杆菌和波氏杆菌混合感染,与已报道的PCR检测方法符合率为100%。表明该研究建立的双重PCR体系可为临床猪巴氏杆菌、波氏杆菌及混合感染提供一种灵敏且高效的检测方法。

关 键 词：猪 巴氏杆菌 波氏杆菌 双重PCR 

分 类 号：S858.28[农业科学—临床兽医学]