清热活血汤调控自噬-内质网应激轴改善大鼠心肌缺血再灌注损伤  

作　　者：李睿 章洁淳[2] 纪树亮 孙治中 王祎昕 杨晓丹 林晋海 邱艺俊 卿立金[4] 吴伟[4] 

机构地区：[1]广州中医药大学第一临床医学院,广东广州440100 [2]广州医科大学附属中医医院,广东广州440100 [3]广州中医药大学基础医学院,广东广州440100 [4]广州中医药大学第一附属医院,广东广州440100

出　　处：《时珍国医国药》2023年第7期1567-1573,共7页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：国家自然科学基金(82074356);广东省广州市科技局市校(院)联合资助项目基础与应用基础研究(202201020358);广州中医药大学“双一流”与高水平大学学科协同创新团队项目(2021xk42)。

摘　　要：目的探讨清热活血汤改善心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用及机制。方法96只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、清热活血汤低、中、高剂量组(4.94,9.88,19.79 g·kg^(-1)·d^(-1)),雷帕霉素组、氯喹组、高剂量清热活血汤联合氯喹组,每组12只,适应喂养1周后,连续给药2周,末次给药12h后,除假手术组外均予以MIRI造模。采用伊文思蓝/TTC双染色观察心肌梗死面积;HE染色观察心肌组织病理损伤;TUNEL染色观察心肌组织细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测组织凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)、自噬(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、P62)及内质网应激蛋白(GRP78、CHOP、FAM134B)的表达;免疫荧光染色观察LAMP2/LC3B、FAM134B/LC3B共定位表达。结果与假手术组比较,模型组心梗面积显著增加(P<0.001),心肌细胞肿胀、肌丝断裂、组织间隙水肿、白细胞浸润等病理损伤严重,细胞凋亡率显著增加(P<0.001),Bax/Bcl-2、GRP78、CHOP、P62蛋白表达均显著上调(P<0.05);与模型组比较,清热活血汤呈剂量依赖性地减少MIRI大鼠心梗面积(P<0.01)、心肌组织病理损伤及细胞凋亡率(P<0.001),促进LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、FAM134B蛋白表达(P<0.01),同时下调Bax/Bcl-2、GRP78、CHOP、P62表达(P<0.01),高剂量清热活血汤促进LAMP2/LC3B、FAM134/LC3B荧光共定位表达效果优于雷帕霉素(P<0.05),氯喹可一定程度上抑制清热活血汤上述心肌保护作用(P<0.05)。结论清热活血汤通过促进MIRI大鼠心肌自噬流,抑制内质网应激及其凋亡通路的激活,从而减轻心肌组织损伤、细胞凋亡及心梗面积的扩大,其调控机制与FAM134B介导的内质网自噬相关。

关 键 词：清热活血汤 心肌缺血再灌注损伤 FAM134B 内质网自噬 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]