蓝萼甲素对缺氧/复氧诱导的H9c2细胞损伤模型HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的影响  

作　　者：杜玥 李莎 梅齐建 肖鸣 

机构地区：[1]长江航运总医院,武汉430010

出　　处：《中西医结合心脑血管病杂志》2023年第21期3936-3940,共5页Chinese Journal of Integrative Medicine on Cardio-Cerebrovascular Disease

摘　　要：目的:探讨蓝萼甲素(GLA)对缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2细胞损伤的保护作用以及与高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路的关系。方法:体外培养H9c2心肌细胞并构建H9c2细胞H/R损伤模型,实验分为6组:对照组(正常培养)、模型组(构建H/R细胞模型)、GLA-L组(细胞中加入5μmol/L的GLA后构建H/R细胞模型)、GLA-M组(细胞中加入10μmol/L的GLA后构建H/R细胞模型)、GLA-H组(细胞中加入20μmol/L的GLA后构建H/R细胞模型)、GLA-H+甘草素组(细胞中加入20μmol/L的GLA和100μg/mL的HMGB1/TLR4/NF-κB通路抑制剂甘草素后构建H/R细胞模型)。CCK-8法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平;试剂盒测定细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测HMGB1、TLR4、NF-κB p65 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测HMGB1、TLR4、NF-κB p65蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组H9c2细胞存活率和SOD含量明显降低,细胞凋亡率、LDH、MDA、ROS、TNF-α、IL-6含量及HMGB1、TLR4表达与NF-κB p65磷酸化水平均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,GLA-L组、GLA-M组、GLA-H组H9c2细胞存活率和SOD含量明显升高,细胞凋亡率、LDH、ROS、MDA、TNF-α、IL-6含量及HMGB1、TLR4表达与NF-κB p65磷酸化水平明显降低,均呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(P<0.05)。与GLA-H组相比,GLA-H+甘草素组H9c2细胞HMGB1、TLR4表达与NF-κB p65磷酸化水平、细胞凋亡率、LDH、MDA、ROS、TNF-α、IL-6含量均进一步下降,细胞存活率和SOD含量进一步上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:GLA可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路,降低细胞凋亡率,减少炎性因子表达

关 键 词：蓝萼甲素 H9C2细胞 缺氧/复氧 高迁移率族蛋白B1 实验研究 

分 类 号：R542.2[医药卫生—心血管疾病]