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机构地区:[1]贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025 [2]贵州省动物生物制品工程技术研究中心,贵州贵阳550016
出 处:《贵州畜牧兽医》2023年第6期51-54,共4页Guizhou Journal of Animal Husbandry & Veterinary Medicine
基 金:“载脂蛋白B mRNA编辑酶催化样蛋白3F在PRRSV复制中的作用机制研究”国家自然科学基金(32060794);“线上线下混合式教学《兽医免疫学》课程建设”贵州大学2020年省级教学内容和课程体系改革项目(GZJG20200035);“APOBEC3F真核表达载体的构建及其鉴定”贵州大学大学生创新基金[贵大SRT字(20)号]。
摘 要:为了构建猪源APOBEC3F-N端结构域真核载体,探究APOBEC3F与猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)作用的功能区域,以猪源APOBEC3F-N端结构域为研究对象,根据APOBEC3F蛋白二级结构预测结果设计APOBEC3F-N端结构域引物,以pcDNA3.1(+)5’Flag-APOBEC3F重组质粒为模板进行APOBEC3F-N端结构域PCR扩增,通过无缝克隆技术连接扩增产物至pcDNA3.1(+)5’Flag,构建重组质粒pcDNA3.1(+)5’Flag-APOBEC3F-N,并进行测序鉴定。结果:试验扩增出APOBECF-N端结构域序列,并将该序列连接至pcDNA3.1(+)5’Flag载体,经测序鉴定pcDNA3.1(+)5’Flag-APOBEC3F-N重组质粒构建成功。结论:构建的猪源APOBEC3F-N端结构域真核表达载体可作为研究APOBEC3F与PRRSV相互作用机制的基础。
关 键 词:APOBEC3F-N端 结构域 真核表达
分 类 号:S858.28[农业科学—临床兽医学] Q71[农业科学—兽医学]
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