实时荧光定量TaqManPCR检测鸭圆环病毒Ⅱ型方法的建立及初步应用  

作　　者：邵明辰 刘湘 吴晓薇 梁昭平[5] 曾小辉 蔡广娣 熊金光 王友令 

机构地区：[1]山东省鲁南牧工商有限公司,山东枣庄277500 [2]广州达农生物科技有限公司,广州510665 [3]广州天易生物科技有限公司,广州510650 [4]广州海关技术中心,广州510623 [5]华南农业大学兽医学院,广州510642

出　　处：《养禽与禽病防治》2023年第12期12-18,共7页Poultry Husbandry and Disease Control

摘　　要：本研究旨在建立一种适用检测于鸭圆环病毒I型的实时荧光定量TaqManPCR技术。以鸭圆环病毒Ⅱ型(DuCV-Ⅱ-SDWF-22株)DNA为模板,建立检测鸭圆环病毒Ⅱ型的实时荧光定量PCR方法。制备含有上述DuCV-Ⅱ目的片段的DNA为标准品,以10倍比稀释的标准品建立标准曲线,测定敏感性。同时采用5个稀释度的标准品验证该方法的批内和批间重复性,并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果:建立的实时荧光定量TaqMan PCR方法仅在鸭圆环病毒ⅡI型DNA样本中检出荧光信号。最低检出量为2.5×10(1)copies/μL;线性范围达10个数量级。该方法重复性良好,批内变异系数不足0.4%;批间变异系数不足1%。经临床样本检测并与常规PCR检测符合率高达98.55%,以上结果表明,研究建立的DuCV-ⅡI实时荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强、重复性好,可用于临床样品中鸭圆环病毒Ⅱ型的快速检测,从而减少DuCV-Ⅱ在鸭群间的传播,保护鸭群的免疫系统以降低其他病原菌继发感染的可能性,提高经济效益。

关 键 词：鸭圆环病毒 实时荧光定量PCR TAQMAN探针 

分 类 号：S855.3[农业科学—临床兽医学]