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作 者:黄国梁 吴晓妮 邹荣华 李倩倩 葛家振 宋国栋 郑福英[2] 蔺国珍[1]
机构地区:[1]西北民族大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730030 [2]中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室,甘肃兰州730046
出 处:《甘肃畜牧兽医》2023年第6期62-66,共5页Gansu Animal Husbandry and Veterinary Medicine
基 金:国家自然科学基金(32260882);中央高校基本科研业务费专项资金项目(31920220137)。
摘 要:本研究旨在获得高纯度鸭脑微血管内皮细胞(Brain microvascular endothelial cells,BMECs),并建立其永生化细胞系,为研究鸭疫里默氏杆菌的致病机制提供重要的试验材料。通过胰蛋白酶消化的方法成功分离出樱桃谷鸭原代BMECs,通过猿猴病毒40(Simian virus 40,SV40)转染的方法,转染后连续传12代获得樱桃谷鸭BMECs永生化细胞系。对BMECs的细胞核以及内皮细胞的标志性蛋白血管性血友病因子(von Willebrand Factor,vWF)进行免疫荧光染色观察,对原代细胞和永生化细胞系进行鉴定。结果显示,成功从樱桃谷鸭脑组织中分离出BMECs并传代培养,经慢病毒转染后体外传代培养12代以上,细胞仍稳定表达vWF,成功建立了樱桃谷鸭BMECs永生化细胞系。
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