雷帕霉素对细胞缝隙连接功能和连接蛋白表达的影响  

The influence of rapamycin on gap junction function and connexin expression

作　　者：魏尔婷 赵青 钟意 汤南 WEI Erting;ZHAO Qing;ZHONG Yi;TANG Nan(School of Pharmacy,Guangdong Medical University,Dongguan 523808,China)

机构地区：[1]广东医科大学药学院,广东东莞523808

出　　处：《药学研究》2024年第2期111-114,158,共5页Journal of Pharmaceutical Research

基　　金：广东省医学科研基金(No.A2021161)。

摘　　要：目的 观察雷帕霉素对人脐静脉内皮细胞HUVEC、大鼠肝细胞BRL-3A和小鼠肝细胞AML12细胞缝隙连接(GJ)功能及连接蛋白表达的影响。方法 采用CCK-8测定不同浓度雷帕霉素分别作用HUVEC、BRL-3A和AML12后的细胞存活率,筛选雷帕霉素不影响3种细胞生长的作用浓度;采用细胞接种荧光示踪法和Western blotting检测不同浓度雷帕霉素对HUVEC、BRL-3A、AML12的GJ功能及连接蛋白37(Cx37)和连接蛋白32(Cx32)的影响。结果 5、10、25、50 nmol·L^(-1)的雷帕霉素分别作用HUVEC、BRL-3A、AML12细胞2 h,对细胞生长无显著性影响。采用以上浓度的雷帕霉素分别处理细胞后,与对照组相比,可降低calcein在GJ间的荧光传递(P<0.05),并且雷帕霉素浓度为25、50 nmol·L^(-1)时,HUVEC细胞中的Cx37、BRL-3A和AML12细胞中的Cx32蛋白表达显著性下降(P<0.05)。结论 雷帕霉素作用HUVEC、BRL-3A、AML12细胞后,对不同细胞GJ功能具有一定的抑制作用,并且可下调Cx37和Cx32的蛋白表达。Objective To investigate the effect of rapamycin on gap junction(GJ)function and connexin(Cx)expression in HUVEC,BRL-3A and AML12 cells.Methods CCK-8 assay was used to detect the cell viability of HUVEC,BRL-3A and AML12 cells treated with different concentrations of rapamycin.Parachute dye-coupling assay and Western blotting were used to detect GJ function and Cx expression level.Results With rapamycin at 5,10,25,50 nmol·L^(-1) concentrations for 2 h,the cell growth of HUVEC,BRL-3A and AML12 were not affected,and the dye coupling were reduced comparing with control(P<0.05),and the expression level of Cx37 and Cx32 were significantly decreased at concentrations of 25 and 50 nmol·L^(-1)(P<0.05).Conclusion Rapamycin could inhibit the GJ function and downregulate the expression of Cx37 and Cx32 in HUVEC,BRL-3A and AML12 cells.

关 键 词：雷帕霉素 细胞缝隙连接 连接蛋白 HUVEC BRL-3A AML12 

分 类 号：R966[医药卫生—药理学]