基于VIGS技术的烤烟烟碱调控及对烟碱含量的影响  

Regulation of nicotine in flue-cured tobacco based on VIGS technology and its effect on nicotine content

作　　者：杨再军 张丽 张福强 张权 昝建朋 田举要 白茂军 徐世晓[1] Yang Zaijun

机构地区：[1]河南农业大学烟草学院,河南郑州450002 [2]贵州省烟草公司安顺市公司,贵州安顺561000

出　　处：《江苏农业科学》2024年第6期61-67,共7页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：贵州省烟草公司安顺市公司项目(编号:2023520400240038);广西壮族自治区烟草公司百色市公司项目(编号:202245100020409)。

摘　　要：在对烤烟原料要求烟碱含量低的中烟工业企业中,烟碱含量过高的烟叶难以在原料配方中适配,导致工业可用性较低。为了降低烟叶中烟碱的含量,通过病毒诱导基因沉默技术(virus induced gene silencing,VIGS)构建烟碱合成过程中4个关键基因(NtA622、NtPMT、NtBBL、NtMYB305a)的靶向沉默体系,探究瞬时沉默对基因相对表达量及烟碱含量的影响,并对不同载体的沉默效率与烟碱降低率进行贡献度分析。结果表明,通过目标序列靶片段成功构建了基于VIGS技术的沉默载体;T2处理沉默NtPMT基因后,最大沉默效率为55.23%,T3处理沉默NtBBL基因后,沉默效率为50.78%,两者差异不显著;各处理沉默相应基因后,不仅表现出对应基因表达量的下调,同时对本研究中其他基因的表达量也有影响;烟碱降低最多的是T3处理,降低率达到39.34%,同时T3处理沉默NtBBL基因的沉默效率对烟碱降低的贡献度最大,为0.775。本研究建立的VIGS技术体系有效沉默目的基因的表达,沉默NtBBL基因的T3处理沉默效率较高,烟碱含量较低,为调控烟碱含量提供了一种新思路与方法。

关 键 词：VIGS 烟碱 载体构建 相对基因表达量 病毒诱导的基因沉默 

分 类 号：TS441[农业科学—烟草工业]