实时荧光定量TaqManPCR检测禽腺病毒C4型方法的建立及初步应用  

作　　者：袁朝霞[1] 刘湘 王友令 吴晓薇 梁昭平[5] 刘兆洁 曾小辉 蔡广娣 熊金光 

机构地区：[1]仲恺农业工程学院,广州510225 [2]广州达农生物科技有限公司,广州510665 [3]广州天易生物科技有限公司,广州510650 [4]广州海关技术中心,广州510623 [5]华南农业大学兽医学院,广州510642 [6]广东省华晟生物技术有限公司,广州511300

出　　处：《养禽与禽病防治》2024年第5期9-14,共6页Poultry Husbandry and Disease Control

摘　　要：研究旨在建立一种检测禽腺病毒C4型的实时荧光定量TaqManPCR技术。以禽腺病毒C4型(Fowl aviadenovirus 4 isolate SD1601/FAdV-4株)DNA为模板,建立检测禽腺病毒C4型的实时荧光定量PCR方法。制备含有上述FAdV-C4目的片段的DNA作为标准品,以10倍比稀释的FAdV-C4标准品建立标准曲线,测定敏感性。同时采用5个稀释度的标准品验证该方法的批内和批间重复性,并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果:建立的实时荧光定量TaqManPCR方法仅在FAdV-C4DNA样本中检出荧光信号。最低检出量为4.738×10^(2)copies/μL,敏感性良好,是常规PCR的100倍;线性范围达9个数量级。该方法重复性良好,批内和批间的变异系数均在0.9%以下。以上结果表明,建立的FAdV-C4实时荧光定量PCR检测方法灵敏度高、特异性强和重复性好,有用于临床样品中禽腺病毒C4型的快速检测潜力,为诊断FAdV-C4提供分子生物学依据,以降低FAdV-C4对我国养禽业的影响。

关 键 词：禽腺病毒 禽腺病毒C4型 实时荧光定量PCR 

分 类 号：S855.3[农业科学—临床兽医学]