马疱疹病毒1型gB-gD融合基因真核表达载体的构建与表达  

作　　者：蔡炜帆 刘建华[1] 邓智超 撒瑞雪 张嗣玉 

机构地区：[1]新疆农业大学动物医学学院,新疆乌鲁木齐830052

出　　处：《当代畜牧》2024年第2期54-57,共4页Contemporary Animal Husbandry

基　　金：新疆维吾尔自治区高校科研计划项目(XJEDU20211012);新疆农业大学大学生创新训练计划项目(S202210758063)。

摘　　要：为构建马疱疹病毒1型gBgD融合基因真核表达载体,笔者将gB与gD的抗原优势区直接相连,经密码子优化后由公司合成目的基因,双酶切后将gBgD融合基因连接至pcDNA3.1载体,经PCR、酶切与测序验证后转染HEK293T细胞,用Western bolt验证蛋白的体外表达,将质粒导入小鼠体内,用IHC验证蛋白的体内表达。结果显示,重组质粒pcDNA3.1-gB-gD经PCR和双酶切均能显示2337 bp的清晰条带,与预期大小相符且测序正确。Western blot检测显示在87kDa处出现了清晰条带,与预期大小相符。IHC检测显示黄棕色特异性免疫沉淀。本研究成功构建了马疱疹病毒1型gBgD融合基因真核表达载体,在体外和体内均成功表达了反应原性良好的gBgD融合蛋白,为EHV-1新型DNA疫苗的研究奠定了基础。

关 键 词：马疱疹病毒1型 GB GD 真核表达 DNA疫苗 

分 类 号：S855.3[农业科学—临床兽医学] R446[农业科学—兽医学]