基于受体交联蛋白激酶3探讨马钱苷对心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用机制  

作　　者：许卫攀 钟可文 徐航 金道群 刘滴 王琪[1] 

机构地区：[1]武汉科技大学黄石市中心医院研究生联合培养基地,湖北黄石435000 [2]武汉科技大学医学部医学院,湖北武汉430000

出　　处：《时珍国医国药》2024年第4期848-852,共5页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：湖北省自然科学基金项目(2022CFB159);湖北省卫健委基金项目(WJ2023F061);湖北理工学院校级项目(22xjz6Q);黄石市中心医院院级科研项目(ZX2023M02)。

摘　　要：目的基于受体交联蛋白激酶3(RIPK3)探讨马钱苷对心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的作用及机制。方法分别使用马钱苷和(或)RIPK3激动剂Necrolr 1预处理H9C2心肌细胞24 h后构建H/R模型,使用CCK-8检测心肌细胞活力,使用ELISA法检测LDH释放水平,使用药物-分子对接分析马钱苷与RIPK3的分子作用,使用Hoechst/PI荧光双染色观察凋亡和程序性坏死比率,使用Calcein AM探针检测线粒体膜通透性转换孔(mPTP)开放程度,使用Western blot检测p-RIPK3、t-RIPK3、p-MLKL、t-MLKL、Cyt-c、cleaved Caspase-9和cleaved Caspase-3的蛋白表达水平。结果一般状态下,马钱苷预处理对心肌细胞无明显毒性用,在H/R处理后发现25μmol/L马钱苷可显著升高细胞活力并降低LDH释放水平。药物-分子对接预测马钱苷与RIPK3具有可靠的结合位点,结合力为-5.68 kcal/mol。马钱苷预处理可降低Hoechst/PI阳性率,抑制mPTP开放,并同时下调p-RIPK3、p-MLKL、Cyt-c、cleaved Caspase-9和cleaved Caspase-3等程序性坏死和细胞凋亡相关蛋白的表达水平,而马钱苷和RIPK3激动剂Necrolr 1共处理则可显著削弱马钱苷对程序性坏死和细胞凋亡的抑制作用。结论马钱苷通过抑制RIPK3的磷酸化活化以同时抑制细胞凋亡和程序性坏死的发生,从而有效减轻心肌细胞H/R损伤。

关 键 词：缺氧/复氧损伤 心肌缺血再灌注损伤 RIPK3 程序性坏死 细胞凋亡 

分 类 号：R541[医药卫生—心血管疾病]