基于TLR4/NF-κB信号通路探讨祛脂愈肝汤对肝星状细胞增殖、凋亡的影响  

作　　者：石思 李开楊 赵琦 胡奕 吴小梅 汪倩 杨梅 

机构地区：[1]贵州中医药大学,贵州贵阳550005 [2]贵州中医药大学第二附属医院,贵州贵阳550003

出　　处：《时珍国医国药》2024年第5期1063-1067,共5页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：国家自然科学基金(82160866);贵州省科技计划项目(黔科合基础-ZK[2023]一般433);贵州省卫生健康委科学技术基金项目(gzwkj2023-208);贵州中医药大学大学生创新创业项目(YJSKYJJ[2021]168);贵州省高等学校重点实验室(黔教技[2023]017号)。

摘　　要：目的探讨祛脂愈肝汤含药血清对肝星状细胞(HSC-T6)增殖、凋亡及TLR4/NF-κB信号通路的影响。方法制备祛脂愈肝汤含药血清,通过抵抗素诱导HSC-T6细胞建立非酒精性脂肪性肝纤维化模型,设置空白组、模型组、祛脂愈肝汤含药血清低、中、高剂量组及吡格列酮组,采用细胞增殖与毒性检测法(CCK-8)检测各组细胞增殖情况,油红O染色观察脂质沉积程度,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、IκB磷酸化激酶(IKK alpha/beta)的蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组细胞表现为激活型状态,细胞内蓄积有大量橘红色脂滴,细胞增殖率升高(P<0.05),细胞上清液IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01),TLR4/NF-κB通路相关的TLR4、NF-κB和IKK的蛋白表达水平均显著增高(P<0.01)。与模型组比较,各药物组细胞生长被抑制,细胞内脂滴减少,均可抑制细胞增殖(P<0.05),并能促进细胞凋亡(P<0.05),相关炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达均明显降低(P<0.01),TLR4/NF-κB通路相关的TLR4、IKK和NF-κB的蛋白表达水平均显著下调(P<0.01)。结论祛脂愈肝汤能通过调控TLR4/NF-κB信号通路,抑制细胞增殖活化,促进凋亡,减少相关炎症因子释放,从而达到有效治疗NAFLD肝纤维化的作用。

关 键 词：祛脂愈肝汤 非酒精性脂肪性肝纤维化 肝星状细胞 TLR4/NF-κB信号通路 细胞增殖/凋亡 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]