N端携带HBGAs受体结合表位的兔出血症病毒嵌合VP60蛋白的表达及其免疫原性  

Expression of rabbit hemorrhagic disease virus chimeric VP60 protein carrying HBGAs receptor binding site at the N-terminus and its immunogenicity

作　　者：董文宇 刘维龙 胡波[2,4] 范志宇 魏后军 仇汝龙[2,4] 宋艳华[2,4] 陈萌萌 葛雷 熊富强[1,3] 王芳 Dong Wenyu

机构地区：[1]西藏农牧学院,西藏林芝860000 [2]江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程重点实验室,江苏南京210014 [3]南京农业大学,江苏南京210095 [4]兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心,江苏泰州225300

出　　处：《江苏农业科学》2024年第12期183-187,共5页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：江苏省农业科技自主创新资金[编号:CX(23)1028];现代农业产业技术体系建设专项(编号:CARS-43-C-1)。

摘　　要：将HBGAs受体结合表位插入兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60的N端,分析嵌合VP60蛋白的表达及病毒样颗粒(VLPs)形成情况,并研究N端HBGAs受体结合表位的插入对嵌合VP60蛋白免疫原性的影响。通过VP60蛋白N端起始位点HBGAs受体结合表位的插入,获得表位插入的VP60基因。利用Bac-to-Bac系统构建杆状病毒重组质粒,命名为Bacmid-VP60-CR,转染Sf9昆虫细胞后,得到重组杆状病毒rBac-VP60-CR,经HA、IFA和Western Blot鉴定,结果显示,重组蛋白VP60-CR在Sf 9昆虫细胞中得到高效表达,电镜观察显示其可形成与VP60类似的VLPs结构。将重组蛋白免疫2月龄RHDV血清阴性的新西兰兔,200μg/只,免疫后每周采血检测HBGAs表位抗体水平,同时在免疫后14 d,以RHDV WF株攻毒观察VP60-CR重组蛋白的免疫保护效果。结果显示,与VP60对照相比,VP60-CR蛋白可产生更高水平的针对HBGAs表位的抗体水平,且VP60-CR免疫兔可完全抵抗RHDV强毒的攻击。本研究构建了一种N端插入HBGAs受体结合表位的嵌合VP60蛋白,为研究高免疫原性兔出血症基因工程疫苗抗原奠定了基础。

关 键 词：兔出血症病毒 VP60蛋白 HBGAs 病毒样颗粒 免疫原性 

分 类 号：S855.3[农业科学—临床兽医学] S852.4[农业科学—兽医学]