羊口疮病毒 ORF116 基因真核表达载体的构建  

Construction of Eukaryotic Expression Vector for ORF116 Gene of Orf Virus

作　　者：覃绍洋 周伟杰 庞峰 Qin Shaoyang

机构地区：[1]贵州大学动物科学学院动物医学系,贵州贵阳550025

出　　处：《贵州畜牧兽医》2024年第4期57-59,共3页Guizhou Journal of Animal Husbandry & Veterinary Medicine

基　　金：“羊口疮病毒ORF116基因的毒力功能研究”国家级大学生创新创业训练计划项目(202210657156);动物医学创新型人才的实验技能培训-“羊口疮病毒114蛋白的真核表达与亚细胞定位研究”贵州大学实验室开放项目(SYSKF2024-028);“基于ceRNA调控网络的ORFV114基因的毒力功能研究”贵州省科学技术基金(自然科学)(黔科合基础-ZK[2022]一般093)。

摘　　要：为了构建羊口疮病毒ORF116基因的真核表达载体,以ORFV-JS株基因组为参考序列,PCR特异性扩增ORF116基因;将ORF116基因与pEGFP-N1载体连接后转化大肠杆菌感受态细胞,菌液PCR和测序筛选鉴定阳性单克隆;阳性克隆扩大培养后提取pEGFP-ORF116重组质粒,并进行酶切鉴定。结果:ORF116基因PCR产物为696 bp;菌液PCR共得到3个阳性单克隆,测序结果正确;pEGFP-ORF116重组质粒双酶切得到696 bp的ORF116基因片段。结论:试验成功构建了羊口疮病毒ORF116基因的真核表达载体,为进一步研究该基因的表达及编码蛋白的功能奠定了基础。

关 键 词：羊口疮病毒 ORF116基因 克隆 真核表达载体 

分 类 号：S852.654[农业科学—基础兽医学] Q78[农业科学—兽医学]