葡萄致腐菌灰葡萄孢及其拮抗菌贝莱斯芽孢杆菌的分离鉴定  

Isolation and identification of Botrytis cinerea causing grape rot and its antagonistic bacteria Bacillus velezensisb

作　　者：刘萍 牛新湘[2,5] 管力慧 杨红梅 楚敏[1,4,5] 包慧芳 王宁[1,4,5] 詹发强 林青[1,4] 杨蓉 龙宣杞[1,4] 娄恺 史应武[1,3,4,5] Liu Ping

机构地区：[1]新疆农业科学院微生物应用研究所,新疆乌鲁木齐830091 [2]新疆农业科学院土壤肥料与农业节水研究所,新疆乌鲁木齐830091 [3]新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830052 [4]新疆特殊环境微生物实验室,新疆乌鲁木齐830091 [5]农业农村部西北绿洲农业环境重点实验室,新疆乌鲁木齐830091

出　　处：《江苏农业科学》2024年第15期144-153,共10页Jiangsu Agricultural Sciences

基　　金：国家自然科学基金地区科学基金(编号:31860024);新疆维吾尔自治区重点研发项目(编号:2021B02004,2022B02053-2,2022A02005);国家重点研发计划(编号:2022YFD1400304)。

摘　　要：分离筛选出对葡萄致腐菌灰葡萄孢有较强拮抗作用的拮抗菌,丰富葡萄采后保鲜拮抗菌资源,以期为葡萄灰霉病的生物防治提供理论依据和奠定应用基础。利用组织块分离法在腐烂的葡萄果实中分离得到灰葡萄孢,梯度稀释法从葡萄园土壤中分离得到潜力拮抗菌,通过平板对峙及琼脂扩散法筛选出拮抗作用较强的生防菌,并通过形态学观察、生理生化测定、生物学鉴定确定其种属。通过对拮抗菌进行溶血性测定初步探索其是否对人体有溶血作用。分离得到的葡萄致腐菌通过形态学观察,病原菌PH-23菌丝初期呈灰白色,继续培养会逐渐转变为淡淡的青灰褐色,菌丝繁盛,孢子众多。对病原菌PH-23进行ITS、β-tub序列分析,结合形态学特征确定其为灰葡萄孢。致病力测定结果表明,PH-23接种后葡萄症状与葡萄灰霉病症状相符,腐烂严重。筛选得到对葡萄致腐菌PH-23拮抗作用较强的生防菌TP-1,抑菌圈直径为22.49 mm。通过形态学观察,菌体为杆状,芽孢呈椭圆形,大小为0.62μm×2.35μm。TP-1革兰氏染色阳性。生理生化鉴定结果初步认为TP-1为芽孢杆菌。基于16S rDNA基因、rpoB基因、gyrB基因序列分析确定其为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。拮抗菌TP-1的溶血性测定显示其对人体无溶血作用。拮抗菌TP-1对灰葡萄孢有较强的拮抗作用,在葡萄采后贮藏及生物保鲜中具有潜在的应用价值。

关 键 词：葡萄灰霉病 灰葡萄孢 生物防治 生理生化鉴定 拮抗菌 

分 类 号：S436.631.19[农业科学—农业昆虫与害虫防治]