基于细胞间线粒体转运机制探索养心通脉有效部位方对骨髓间充质干细胞修复心肌缺血再灌注损伤的干预作用  

作　　者：胡鑫 莫云秋[2] 梁柳观 王宗玉 郑景辉[1] 莫少丹 

机构地区：[1]广西中医药大学,广西南宁530200 [2]广西中医药大学附属瑞康医院,广西南宁530011

出　　处：《时珍国医国药》2024年第8期1852-1857,共6页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：国家自然科学基金(8216150886);国家自然科学基金青年基金(82204976):广西中医药大学2023年自治区级硕士研究生科研创新项目(YCSW2023376)。

摘　　要：目的 验证骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)通过细胞间线粒体转运机制修复心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI),并探索养心通脉有效部位方(active principle region of Yangxin Tongmai Formula, apr-YTF)的作用机制,以期找到其更深层面的药用靶点。方法 采用安宁包缺氧体系进行氧糖剥夺4 h并及时复糖-复氧24 h制备MIRI细胞模型,无菌条件下从大鼠股骨、胫骨中提取BMSCs进行培养,取第四代建立BMSCs-MIRI模型细胞共培养体系,并用apr-YTF含药血清进行干预。流式细胞仪检测心肌细胞凋亡水平和线粒体膜电位;激光共聚焦显微镜观察BMSCs-MIRI模型细胞间TNTs生成,并量化分析线粒体置换浓度;鉴定体系中微囊泡(Microvesicles, MVs)的生成,对比各组浓度;Western blot法检测各组转运相关蛋白KIF5B、MIRO1、Cx43以及线粒体内膜蛋白mitofilin的表达。结果 经安宁包缺氧体系复制MIRI模型细胞凋亡增高,线粒体膜电位及mitofilin表达下降。与模型组比较,共培养组可生成TNTs, KIF5B、MIRO1、Cx43、mitofilin蛋白表达与线粒体膜电位增高,MVs生成增多,心肌细胞凋亡率下降。与空白对照组比较,apr-YTF组管内线粒体数量增加,KIF5B、MIRO1、Cx43、mitofilin蛋白表达、线粒体膜电位,及MVs生成都有所增加,心肌细胞凋亡率进一步下降。结论 BMSCs可通过TNTs、GJs与MVs细胞通讯方式挽救MIRI模型细胞线粒体功能,修复受损心肌细胞。apr-YTF可进一步上调BMSCs转运相关蛋白表达以及微囊泡的分泌,提高BMSCs修复MIRI细胞的能力。

关 键 词：养心通脉有效部位方 骨髓间充质干细胞 心肌缺血再灌注损伤 线粒体转运 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]