补肾健脾方联合IFN-γ对Hepg2.2.15细胞IFN-γ/STAT1信号通路的影响  

作　　者：刘影 郑建铭[2] 刘甜甜 孙陈岑 徐汉辰[1] 王磊[1] 

机构地区：[1]上海中医药大学附属龙华医院,上海200030 [2]复旦大学附属华山医院,上海200032

出　　处：《时珍国医国药》2024年第8期1858-1861,共4页Lishizhen Medicine and Materia Medica Research

基　　金：国家自然科学基金(81973725)。

摘　　要：目的 研究补肾健脾方含药血清对γ干扰素(Interferon-gamma, IFN-γ)抗乙型肝炎病毒(Hepatitis b virus, HBV)的增效作用及可能机制。方法 常规制备大鼠含药血清,WST-1法筛选含药血清干预Hepg2.2.15细胞的安全剂量;以不同浓度IFN-γ加补肾健脾方含药血清加入Hepg2.2.15细胞系,检测培养上清中乙型肝炎表面抗原(Hepatitis B surface antigen, HBsAg)、乙型肝炎核心相关抗原(Hepatitis B e antigen, HBeAg)以及乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(Hepatitis B Virus DNA,HBV DNA)水平,筛选补肾健脾方联合IFN-γ给药剂量;筛选出IFN-γ干预剂量后,将Hepg2.2.15细胞分为对照组、IFN-γ单独处理组、IFN-γ联合空白血清组以及IFN-γ联合补肾健脾方含药血清组,干预24h后,收集上清和蛋白样本,检测上清中HBsAg、HBeAg以及HBV DNA水平,蛋白免疫印迹(Western blot, WB)技术检测Hepg2.2.15细胞中γ干扰素(Interferon-gamma, IFN-γ)/信号传导转录激活因子1(Signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)信号通路关键蛋白蛋白,包括精氨酸甲基化转移酶1(Protein arginine methyltransferase 1,PRMT1)、STAT1、磷酸化信号传导转录激活因子1(p-signal transducer and activator of transcription 1,P-STAT1)以及抗病毒蛋白2',5'-寡腺苷酸合成酶3(2'-5'-oligoadenylate synthetase 3,OAS3)、双链RNA依赖的蛋白质激酶(Double-stranded RNA-dependent protein kinase, PKR)、黏病毒耐药蛋白1(Recombinant Myxovirus Resistance 1,Mx1)蛋白表达水平。结果 与IFN-γ单独处理组以及IFN-γ联合5%空白血清组相比,IFN-γ联合5%补肾健脾方含药血清干预Hepg2.2.15细胞24h后,细胞培养上清中HBV DNA、HBeAg水平显著降低(P<0.05),HBsAg未见明显变化(P>0.05);IFN-γ联合5%补肾健脾方含药血清组γ干扰素受体2(Interferon gamma receptor 2,IFNGR2)蛋白表达水平较IFN-γ组显著上调(P<0.05);IFN-γ联合5%补肾健脾方含药血清组γ干扰素受体1(Interferon gamma receptor 1,IFNGR1)、STAT1、P-STAT1、

关 键 词：补肾健脾方 IFN-Γ STAT1 HBV 抗病毒蛋白 

分 类 号：R285.5[医药卫生—中药学]