羊口疮、小反刍兽疫、羊痘病毒三重TaqMan荧光定量PCR方法的建立及应用  

作　　者：朱成 田芯源 陈易 余燕岐 王宪军 朱江江 向华 

机构地区：[1]西南民族大学动物医学四川省高等学校重点实验室,四川成都610041 [2]青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室,四川成都610041

出　　处：《四川畜牧兽医》2024年第10期33-37,40,共6页Sichuan Animal & Veterinary Sciences

基　　金：西南民族大学大学生创新创业训练计划项目(S202310656082);四川省科技计划项目(2023YFN0043)。

摘　　要：为建立一种羊口疮病毒(ORFV)、山羊痘病毒(GTPV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)三种病原的联合共检方法,以ORFV、GTPV和PPRV基因序列为模板,克隆得ORFV-B2L、GTPV-p32、PPRV-N基因序列,并构建三种病原核酸标准品,设计三对探针,建立ORFV、GTPV和PPRV三重TaqMan荧光定量PCR方法,然后对方法的检测条件进行优化及质量评价,并作临床初步验证。结果显示:所建立的ORFV、GTPV和PPRV三重TaqMan荧光定量PCR方法的特异性好,ORFV、PPRV和GTPV最低检测限值分别为2.98×101、3.81×101、6.68×10^(1)copies/μL;稳定性好,与商品化检测试剂盒和OIE标准相比具有较高的检测符合率;对279份临床样本作检测,ORFV、PPRV和GTPV的阳性检出率分别为34%、4.3%、2.5%,ORFV和GTPV的混合感染率为2.5%。

关 键 词：羊口疮病毒(ORFV) 小反刍兽疫病毒(PPRV) 羊痘病毒(GTPV) 多重TaqMan荧光定量PCR 

分 类 号：S854.43[农业科学—临床兽医学]