蒿甲醚通过诱导肝星状细胞铁死亡改善肝纤维化病变损伤的作用机制研究  

Study on the Mechanism of Artemether in Improving Liver Fibrosis Damage by Inducing Iron Death in Hepatic Stellate Cells

作　　者：庄延双[1] 张自力[2] ZHUANG Yanshuang;ZHANG Zili

机构地区：[1]南京中医药大学泰州附属医院,江苏泰州225300 [2]南京中医药大学药学院,江苏南京210023

出　　处：《湖北中医杂志》2024年第11期12-16,共5页Hubei Journal of Traditional Chinese Medicine

基　　金：国家自然科学基金青年基金项目(项目编号:82000572);南京中医药大学自然科学基金项目(项目编号:XZR 2023090)。

摘　　要：目的观察蒿甲醚通过诱导肝星状细胞(HSC)铁死亡改善肝纤维化病变损伤的生物学作用及分子机制。方法建立经典的CCl4致小鼠肝纤维化模型,腹腔注射10mg/kg蒿甲醚治疗4周,H&E染色考察蒿甲醚对肝组织病变损伤的影响。体外培养鼠源肝星状细胞系HSC,给予20μM浓度蒿甲醚处理24h,运用Real-timePCR探究蒿甲醚对HSC活化标志物α-SMA、Collagen 1mRNA和FibronectinmRNA表达水平的影响;铁离子、活性氧自由基(ROS)和丙二醛(MDA)试剂盒检测蒿甲醚对HSC铁死亡指标的影响;运用Real-timePCR检测蒿甲醚对YAPmRNA和YAP蛋白表达水平的影响。铁死亡抑制剂Ferrostatin-1或YAP抑制剂Verteporfin处理HSC细胞系,加入20μM蒿甲醚处理24 h,铁离子和MDA试剂盒检测蒿甲醚对HSC铁死亡与活化的影响。结果与模型组比较,蒿甲醚能够明显缓解小鼠肝脏假小叶病变,改善肝小叶结构,显著减少纤维组织增生,减轻炎性细胞浸润,可剂量依赖性地降低HSC活化标志物α-SMA、Collagen1和Fibronectin的mRNA水平(P<0.01);与蒿甲醚组比较,铁死亡抑制剂Ferrostatin-1能够显著降低铁离子、ROS和MDA水平,可降低ACSL4mRNA水平(P<0.01),升高GPX4和SLC7A11的水平(P<0.01);与模型组比较,蒿甲醚可显著上调YAPmRNA和YAP蛋白的水平(P<0.01);与模型组比较,蒿甲醚组铁离子和MDA水平显著升高(P<0.01);使用YAP经典抑制剂Verteporfin进行反向验证,与蒿甲醚组比较,Verteporfin能够显著降低YAPmRNA和YAP蛋白的水平(P<0.01)。结论蒿甲醚通过诱导YAP依赖性的铁死亡抑制HSC活化,从而改善肝纤维化病变损伤。

关 键 词：肝纤维化 肝星状细胞 蒿甲醚 铁死亡 YAP 作用机制 

分 类 号：R285[医药卫生—中药学]