猪圆环病毒3型Cap蛋白原核表达及ELISA方法建立  

作　　者：李群辉 吴雨 代锐 林丽苗 赵海参 洪家兵 王连想 

机构地区：[1]温氏食品集团股份有限公司研究院,广东云浮527400 [2]岭南现代农业科学与技术广东省实验室云浮分中心,广东云浮527400

出　　处：《上海畜牧兽医通讯》2024年第6期12-19,共8页Shanghai Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine

基　　金：“十四五”广东省农业科技创新十大主攻方向“揭榜挂帅”项目(2023SDZG02)。

摘　　要：本研究通过设计同源重组引物扩增cap基因,并重组到pET-28a原核表达载体中;阳性质粒经IPTG诱导表达,表达蛋白经纯化后,获得截短的带有His标签的PCV3 Cap蛋白;以Cap蛋白作为包被抗原,建立PCV3抗体间接ELISA检测方法;对ELISA检测方法的抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释倍数、二抗稀释度、二抗稀释度、包被条件、封闭条件、血清反应时间、二抗反应时间、显色时间等进行优化,确定临界值(血清D_(450)≥0.239时,PCV3阳性;血清D_(450)≤0.213时,PCV3阴性;0.213<血清D_(450)<0.239时,可疑),优化的ELISA检测方法具有较好的特异性和较高的重复性。这为PCV3抗体的临床检测以及后续疫苗研究提供参考。

关 键 词：猪圆环病毒3型 CAP蛋白 原核表达 ELISA 

分 类 号：S852.651[农业科学—基础兽医学]