利拉鲁肽通过PKA-ChREBP途径减少代谢相关脂肪性肝病细胞模型的脂质沉积  

作　　者：邱友燕 曾炼坤 熊静妮 蒋婵 李素燕 刘雪芳 陈丹丹 

机构地区：[1]广州医科大学附属第四医院内分泌科,广东广州511300 [2]广州医科大学附属第四医院临床营养科,广东广州511300

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第19期4777-4782,共6页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：广州市科技计划项目资助(202102080534,2024A03J0944)。

摘　　要：目的探究利拉鲁肽通过蛋白激酶A-碳水化合物反应元件结合蛋白(PKA-ChREBP)途径减少代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)细胞模型的脂质沉积。方法采用不同浓度油酸处理人肝癌细胞HepG2构建MAFLD模型,油红O染色观察细胞脂质堆积情况,将细胞分为对照组、模型组、模型+si-NC组、模型+si-GLP-1R组、模型+si-GLP-1R+利拉鲁肽组,采用油酸处理建模,模型+si-NC组、模型+si-GLP-1R组、模型+si-GLP-1R+利拉鲁肽组。用胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)激动剂利拉鲁肽(10 nmol/L)处理MAFLD模型细胞3、6、12、24 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹法检测细胞中GLP-1R表达。分别用GLP-1R敲低质粒(si-GLP-1R)、利拉鲁肽处理MAFLD模型细胞,分别采用实时荧光定量PCR、Western印迹法、ELISA和分光光度法检测PKA、腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)、环磷酸腺苷(cAMP)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAT)和三酰甘油(TG)表达。分别用利拉鲁肽、PKA抑制剂、AMPK抑制剂处理MAFLD模型细胞,通过免疫荧光法和Western印迹法检测ChREBP表达。结果与模型组比较,模型+si-GLP-1R组脂质沉积增多,TG含量、ChREBP、ACC、FAS、GPAT mRNA表达升高,GLP-1R mRNA、p-ChREBP蛋白、PKA mRNA及蛋白、cAMP、p-PKA蛋白表达降低,差异显著(P<0.05);与模型+si-GLP-1R组比较,模型+si-GLP-1R+利拉鲁肽组脂质沉积减少,TG含量、ChREBP、ACC、FAS、GPAT mRNA表达降低,GLP-1R mRNA、p-ChREBP蛋白、PKA mRNA及蛋白、cAMP、p-PKA蛋白表达升高,差异显著(P<0.05)。但各组AMPK mRNA及蛋白、p-AMPK蛋白表达的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,模型+利拉鲁肽组胞质/核内ChREBP荧光密度及p-ChREBP表达升高,差异显著(P<0.05);与模型+利拉鲁肽组比较,模型+利拉鲁肽+PKA抑制剂组、模型+利拉鲁肽+AMPK抑制剂组胞质/核内ChREBP荧光密度及p-ChREBP表达降低,差异显著(P<0.05)。�

关 键 词：代谢相关脂肪性肝病 HepG2细胞 利拉鲁肽 胰高血糖素样肽1受体 蛋白激酶A/碳水化合物反应元件结合蛋白途径 

分 类 号：R589.2[医药卫生—内分泌]