LncRNA KCNQ1OT1靶向调控miR-24-3p/VEGFA轴对慢性阻塞性肺疾病大鼠血管重塑的影响及相关机制  

作　　者：郭莎 陈小菊 谭婷婷 

机构地区：[1]川北医学院,四川南充637000 [2]成都大学临床医学院附属医院呼吸与危重症医学科

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第18期4585-4591,共7页Chinese Journal of Gerontology

摘　　要：目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)KCNQ1对链/反义转录本(KCNQ1OT)1靶向调控微小RNA(miR)-24-3p/血管内皮生长因子(VEGFA)轴对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠血管重塑的影响及作用机制。方法采用烟熏法结合气道滴注脂多糖构建COPD大鼠模型,取肺组织进行成纤维细胞原代及传代培养,并使用sh-NC和sh-KCNQ1OT1(sh1和sh2)慢病毒转染COPD成纤维细胞。将细胞分为对照组、COPD组、sh-NC组和sh1组,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测各组细胞中KCNQ1OT1、miR-24-3p和VEGFA表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-24-3p与KCNQ1OT1、VEGFA之间的靶向关系。采用人脐静脉内皮细胞HUVEC,分别加入转染sh-NC、sh1、sh1+miR-24-3p抑制物(miR-24-3p inhibitor)和sh1+VEGFA过表达的COPD成纤维细胞培养液,考察各组细胞管状结构生成情况。将SD大鼠随机分为对照组、COPD模型组、sh1组、sh1+miR-24-3p inhibitor组和sh1+VEGFA组各10只。造模成功后,sh1组采用尾静脉注射慢病毒进行干涉,sh1+miR-24-3p inhibitor组采用尾静脉注射慢病毒和miR-24-3p inhibitor进行干涉、sh1+VEGFA组采用尾静脉注射慢病毒和VEGFA进行干涉。检测各组肺功能和血管重塑指标。采用免疫组化和Western印迹检测检测肺组织中VEGFA蛋白表达。结果与对照组相比,COPD组细胞中KCNQ1OT1和VEGFA表达水平显著上升,miR-24-3p表达水平显著下降(P<0.05);与COPD组相比,sh1组细胞中KCNQ1OT1和VEGFA表达水平明显下降,miR-24-3p水平明显上升(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,KCNQ1OT1与miR-24-3p及miR-24-3p与VEGFA之间存在潜在靶向关系。体外管状结构生成实验结果表明,相较于sh-NC组,sh1组管状结构生成数量明显降低(P<0.05);与sh1组相比,miR-24-3p inhibitor组和sh1+VEGFA组管状结构生成数量明显增加(P<0.05)。动物实验结果表明,与对照组相比,COPD模型组吸气阻力和呼气阻力明显增加,肺动态顺应性和分钟最大通气量�

关 键 词：长链非编码RNA KCNQ1对链/反义转录本1 慢性阻塞性肺疾病 微小RNA(miR)-24-3p 血管重塑 血管内皮生长因子A 

分 类 号：R563.9[医药卫生—呼吸系统]