HPV16E6对宫颈癌细胞HeLa细胞活性的影响及微小RNA-466的干预作用  

作　　者：韩杰 张梅英 张玲 刘倩 李鹏[1] 张晓娅 

机构地区：[1]唐山职业技术学院附属医院,河北唐山063000 [2]杭州艾迪康医学检验中心病理科

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第14期3505-3510,共6页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：河北省医学科学研究课题计划(20191637)。

摘　　要：目的 探究HPV16E6对宫颈癌细胞HeLa细胞活性的影响及微小RNA(miR)-466的干预作用。方法 实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测正常宫颈上皮细胞(HUCEC)及4种宫颈癌细胞(HeLa、HT-3、C-33A、AV3)中miR-466表达水平,取宫颈癌细胞将其分为宫颈癌细胞(A)组、宫颈癌细胞+miR-466-NC(B)组,宫颈癌细胞+miR-466 inhibitor(C)组、宫颈癌细胞+miR-466 mimics(D)组、宫颈癌细胞+HPV16E6-NC(E)组、宫颈癌细胞+HPV16E6过表达质粒(F)组、宫颈癌细胞+HPV16E6沉默质粒(H)组、宫颈癌细胞+miR-466 mimics+HPV16E6沉默质粒(I)组,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞的凋亡,Western印迹法检测HPV16E6蛋白表达,双荧光素酶报告实验证实miR-466和HPV16E6的相互作用。结果 与正常宫颈上皮细胞系HUCEC相比,宫颈癌细胞系中的miR-466 mRNA表达量均显著降低,HPV16E6 mRNA表达显著升高(P<0.05),其中HeLa的miR-466、HPV16E6 mRNA表达量变化最明显(P<0.05);A组与B组相比,细胞增殖、凋亡及HPV16E6蛋白表达无统计学差异(P>0.05);与B组相比,C组细胞增殖、HPV16E6蛋白表达明显升高,细胞凋亡明显降低(P<0.05);与C组相比,D组细胞增殖、HPV16E6蛋白表达明显降低,细胞凋亡明显升高(P<0.05);A组与E组细胞增殖、凋亡及HPV16E6蛋白表达无统计学差异(P>0.05);与E组相比,F组细胞增殖、HPV16E6蛋白表达明显升高,细胞凋亡明显降低(P<0.05);与F组相比,H组细胞增殖、HPV16E6蛋白表达明显降低,细胞凋亡明显升高(P<0.05);H组与D组细胞克隆增殖、凋亡及HPV16E6蛋白表达无统计学差异(P>0.05);与H组相比,I组细胞增殖、HPV16E6蛋白表达明显降低,细胞凋亡明显升高(P<0.05);双荧光素酶报告结果显示,转染miR-466后可显著降低HPV16E6-3′-UTR-WT的荧光素酶活性(P<0.05),但对突变基因无显著影响(P>0.05),且miR-466与HPV16E6呈负相关(P<0.001)。结论 HPV16E6对HeLa细胞活性具有显著影响,可抑制细胞凋亡,促进细胞增殖,mi

关 键 词：miR-466 HPV16E6 宫颈癌 细胞活性 

分 类 号：R71[医药卫生—妇产科学]