酸性微环境下TSPAN9介导PD1/PDL1信号通路对胃癌细胞自噬及5-FU耐药的作用机制  

作　　者：明汇 刘娟 李娜 张燕 徐睿 

机构地区：[1]淄博一四八医院,山东淄博255300

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第14期3541-3545,共5页Chinese Journal of Gerontology

摘　　要：目的 探究酸性微环境下四跨膜蛋白(TSPAN)9通过程序性死亡受体(PD)-1/PD-1配体(PD-L1)信号通路对胃癌细胞自噬水平及耐药性的调控机制。方法 选取胃癌SGC7901亲本细胞株及5-氟脲嘧啶(FU)耐药细胞株作为研究对象,采用3%盐酸(HCl)构建肿瘤细胞酸性微环境(pH=7.4,pH=6.5),噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,Western印迹检测各组细胞内TSPAN9、PD-L1、细胞自噬蛋白[P62、Beclin、微管相关蛋白(LC)3]表达;胃癌5-FU耐药细胞株中进行TSPAN9过表达质粒、PD-1/PD-L1信号通路抑制剂(Atezolizumab)处理,分别设置Control组、pcDNA-TSPAN9组、Atezolizumab组及pcDNA-TSPAN9+Atezolizumab组,SGC7901(pH=7.4)组、SGC7901(pH=6.5)组、SGC7901/5-FU(pH=7.4)组、SGC7901/5-FU(pH=6.5)组,MTT法检测各组细胞增殖活性及对5-FU的敏感性,Western印迹检测各组细胞中自噬蛋白、耐药蛋白(MDR-1、MRP)表达。结果 随着培养时间延长,各组胃癌细胞均体现出增殖趋势;SGC7901(pH=6.5)组、SGC7901/5-FU(pH=6.5)组24、48 h细胞增殖能力明显高于SGC7901(pH=7.4)组、SGC7901/5-FU(pH=7.4)组(P<0.05);与SGC7901(pH=7.4)组、SGC7901/5-FU(pH=7.4)组相比,SGC7901(pH=6.5)组、SGC7901/5-FU(pH=6.5)组细胞内TSPAN9、PD-L1、Beclin、LC3蛋白表达上调,P62蛋白下调,差异有统计学意义(P<0.05)。TSPAN9过表达可以明显提升胃癌细胞内PD-L1表达(P<0.05);与Control组相比,pcDNA-TSPAN9组细胞增殖活性(24、48 h)、Beclin、LC3蛋白表达均上调,P62蛋白及对5-FU的敏感性均下调,差异有统计学意义(P<0.05);Atezolizumab组细胞增殖活性(24、48 h)、Beclin、LC3蛋白表达均下调,P62蛋白及对5-FU的敏感性均上调,差异有统计学意义(P<0.05);TSPAN9过表达可以逆转Atezolizumab组胃癌细胞增殖活性(24、48 h)、自噬蛋白及对5-FU敏感性的趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 酸性微环境下TSPAN9通过提升PD-1/PD-L1信号通路活性增强胃癌细胞的自噬水平,最终诱导胃癌细胞5-FU耐药�

关 键 词：胃癌 四跨膜蛋白(TSPAN)9 程序性死亡受体(PD)-1/PD-1配体(PD-L1)信号通路 细胞自噬 5-氟脲嘧啶(FU)耐药 酸性微环境 

分 类 号：R656.6[医药卫生—外科学]