淫羊藿素通过PRMT5调控JAK2/STAT3对肝癌Smmc-7721细胞生物学行为的影响  

作　　者：刘晔 田立强 成昌栋 孙象军 

机构地区：[1]广州中医药大学附属临沂市人民医院肝胆外科,山东临沂276000 [2]临沂市人民医院神经外科重症病区

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第22期5513-5518,共6页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：山东省重点研发计划项目(2018GSF118191);山东省医药卫生科技发展计划项目(2017WS321)。

摘　　要：目的探究淫羊藿素通过蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)5调控Janus激酶(JAK)2/信号转导与转录激活因子(STAT)3信号通路对肝癌细胞Smmc-7721增殖、凋亡、周期、侵袭的影响。方法用1.25、2.50、5.00、10.00、20.00、40.00μmol/L淫羊藿素处理肝癌细胞Smmc-7721,用PRMT5 siRNA转染敲低PRMT5表达,梯度浓度淫羊藿素培养48 h后,通过CCK-8、实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)、Transwell、膜联蛋白(Annexin)Ⅴ-别藻蓝蛋白(APC)/7-氨基放线菌素(AAD)双染色法、流式细胞术、West-ern印迹法检测细胞增殖率、PRMT5表达水平、细胞侵袭能力、细胞凋亡、细胞周期,检测细胞PRMT5蛋白表达、细胞周期蛋白(Cyc-lin)D1及Janus激酶(JAK)2/信号转导和转录激活因子(STAT)3信号通路关键蛋白磷酸化(P)-JAK2、P-STAT3和信号通路上游炎症因子白细胞介素(IL)-6,检测凋亡蛋白成熟的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved-Caspase)3、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平。结果肝癌细胞Smmc-7721中PRMT5表达量显著高于正常肝细胞L-02(P<0.05);CCK-8实验检测后选出淫羊藿素用药效果较为显著的浓度为10.00、20.00、40.00μmol/L,最佳干预时间为48 h;保持淫羊藿素浓度不变,转染后的肝癌细胞增殖率、侵袭力较转染前明显降低(P<0.05);转染前后的肝癌细胞凋亡率与所联合使用的淫羊藿素浓度呈正相关,相同浓度淫羊藿素药物浓度干预时,敲低PRMT5表达肝癌细胞凋亡率显著升高(P<0.05),提示敲低PRMT5表达可促进肝癌细胞凋亡。流式细胞术检测结果提示,转染前后细胞均阻滞于G0/G1期,且转染后阻滞效果更加显著(P<0.05)。不同浓度淫羊藿素处理后,肝癌细胞中PRMT5、Cyclin D1、P-JAK2、P-STAT3、IL-6、Bcl-2蛋白表达均显著降低,凋亡蛋白Cleaved-Caspase3、Bax蛋白表达显著升高,且有浓度依赖性(P<0.05);转染后细胞中PRMT5、Cyclin D1、P-JAK2、P-STAT3、IL-6、Bcl-2�

关 键 词：淫羊藿素 蛋白精氨酸甲基转移酶(PRMT)5 Janus激酶(JAK)2/信号转导和转录激活因子(STAT)3信号通路 肝癌细胞SMMC-7721 增殖、凋亡 

分 类 号：R285[医药卫生—中药学]