慢病毒介导的Piezo1-siRNA基因转染对骨性关节炎患者软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白表达的影响  

作　　者：类凤 邓世吉 刘一楷 李军 常炳营 李娟[5] 

机构地区：[1]山东大学齐鲁医院青岛院区检验科,山东青岛266000 [2]青岛市沙子口卫生院外科 [3]青岛大学附属医院关节外科 [4]高密人民医院骨科 [5]青岛大学附属医院手术室

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第16期4022-4026,共5页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：山东省医药卫生科技发展计划项目(2018WS510)。

摘　　要：目的探讨慢病毒介导的Piezo1-siRNA基因转染对体外培养的骨性关节炎患者软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白表达的影响。方法获取因骨性关节炎行膝关节置换术患者的关节软骨并进行体外培养,取第3代软骨细胞。将慢病毒介导的Piezo1-siRNA1~3分别导入体外培养的软骨细胞,观察各组细胞的转染效率;应用细胞牵张应力加载系统对各组细胞加载周期性牵张应力;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Piezo1 mRNA表达变化,筛选最佳抑制序列;Western印迹检测Ⅱ型胶原蛋白表达。结果慢病毒介导的Piezo1-siRNA转染骨性关节炎软骨细胞后,各组的转染效率均大于90%;24 h周期性牵张应力促进Piezo1 mRNA表达升高的作用最强;对各转染组细胞施加了24 h周期性牵张应力后,各siRNA组Piezo1 mRNA表达水平相比于空白对照组明显降低(P<0.05);Western印迹结果显示,Ⅱ型胶原蛋白表达水平与空白对照组相比明显升高(P<0.05)。结论慢病毒介导的Piezo1-siRNA可有效干扰Piezo1表达,增加Ⅱ型胶原蛋白表达。

关 键 词：软骨细胞 离子通道 Ⅱ型胶原蛋白 RNA干扰 

分 类 号：R684.3[医药卫生—骨科学]