益生菌调控TLR4/NF-κB轴对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞功能的影响  

作　　者：冷冬月 方兴刚 李旭峰 

机构地区：[1]十堰市太和医院(湖北医药学院附属医院)中西医结合科,湖北十堰442000 [2]十堰市人民医院中医科

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第17期4208-4214,共7页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：湖北省卫生健康委2021-2022年度科研项目(WJ2021F032)。

摘　　要：目的探讨益生菌通过调控Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB轴对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(RA-FLS)功能的影响。方法收集RA患者的滑膜组织分离得到RA-FLS细胞,并将3~8代RA-FLS分为对照组(正常培养)、肿瘤坏死因子(TNF)-α组(20 ng/ml的TNF-α)、10、50、100μg/ml益生菌组(20 ng/ml的TNF-α+10、50、100μg/ml益生菌)、pcDNA组、pcDNA-TLR4组、对照+100μg/ml益生菌组(100μg/ml益生菌)。pcDNA组、pcDNA-TLR4组细胞分别转染pcDNA和pcDNA-TLR4,然后使用100μg/ml益生菌干预细胞24 h。噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;Transwell检测细胞迁移和侵袭情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清白细胞介素(IL)-6、IL-1β和IL-10分泌情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western印迹检测细胞TLR4、p-P65、P65、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。结果与对照组相比,TNF-α组细胞存活率、迁移和侵袭个数、细胞上清IL-6和IL-1β水平、细胞TLR4、p-P65、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平显著升高,上清IL-10水平和细胞凋亡率显著降低(P<0.05);对照+100μl/ml益生菌组细胞存活率、细胞迁移和侵袭个数、细胞TLR4、p-P65、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05),细胞上清IL-6、IL-1β和IL-10水平无明显差异(P>0.05);与TNF-α组相比,10、50、100μl/ml益生菌组细胞存活率、迁移和侵袭个数、细胞上清IL-6和IL-1β水平、细胞TLR4、p-P65、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平显著降低,上清IL-10水平和细胞凋亡率显著升高(P<0.05);过表达TLR4后会减弱益生菌对RA-FLS细胞的增殖、迁移和侵袭及TLR4/NF-κB轴的抑制作用。结论益生菌可通过抑制TLR4/NF-κB轴抑制RA-FLS细胞的增殖、迁移和侵袭功能,促进RA-FLS细胞凋亡,缓解RA炎症反应。

关 键 词：益生菌 Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB轴 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 细胞功能 

分 类 号：R593.22[医药卫生—内科学]