大鼠糖尿病足溃疡模型皮肤组织中miRNA对PI3K/AKT通路的调控作用  

作　　者：冯波 王聪 卢增辉 李武龙 郭艳 

机构地区：[1]江西省中西医结合医院血管外科,江西南昌330003 [2]江西省中西医结合医院胃肠外科,江西南昌330003 [3]江西省中西医结合医院超声科,江西南昌330003

出　　处：《中国老年学杂志》2024年第17期4247-4252,共6页Chinese Journal of Gerontology

基　　金：江西省卫生健康委科技计划项目(No.20202008)。

摘　　要：目的研究大鼠糖尿病足溃疡(DFU)模型皮肤组织中miRNA对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)的调控作用。方法通过尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)的方式建立糖尿病大鼠模型,在第15天后再次测量大鼠血糖,以空腹血糖>15 mmol/L为大鼠造模成功的标准。糖尿病大鼠模型构建成功后,在大鼠双侧后肢足背部消毒后切除5 mm×5 mm的全层皮肤,制备DFU模型;对照组则不进行创面造模,正常饲养。4 d后取溃疡组织和对照组相同部位的组织进行miRNA高通量测序并针对PI3K/AKT通路进行数据分析;苏木素-伊红(HE)染色观察溃疡组织和对照组织的状态;TUNEL法检测细胞凋亡;Western印迹检测胰岛素样生长因子(IGF)-1、PI3K、磷酸化(p)-AKT、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)等蛋白表达。结果HE染色显示,模型组造模处组织相对于对照组足背皮肤组织表现出溃疡状态。TUNEL染色结果显示,对照组组织中细胞凋亡很少,模型组组织中则有显著的细胞凋亡现象。Western检测结果显示,对照组组织中IGF-1、PI3K、p-AKT、p-mTOR等蛋白表达都显著低于模型组组织(P<0.05)。miRNA高通量测序检测得到在对照组和模型组之间显著差异表达的miRNA共224个。在差异表达miRNA中筛选rno-miR-339-5p,rno-miR-34a-5p,rno-miR-503-5p,rno-miR-146b-5p,rno-miR-322-5p,rno-miR-149-5p,rno-novel-53-mature,rno-miR-125a-5p,rno-miR-339-3p,rno-miR-3473,rno-novel-30-mature,rno-miR-326-3p,rno-miR-134-5p等与PI3K-AKT信号通路相关的miRNA,并根据这些miRNA的靶基因将这些miRNA标示在京都基因和基因组百科全书(KEGG)中的PI3K/AKT通路上。结论糖尿病大鼠足背溃疡皮肤组织中,PI3K/AKT通路表达上调,对PI3K/AKT起调控作用的miRNA表达也显著变化,从免疫反应、细胞外基质(ECM)-整合素(Integrin)、生长因子和间质上皮转化等多个角度起到促进创口愈合的效果。

关 键 词：磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路 糖尿病足溃疡 细胞外基质(ECM) 京都基因和基因组百科全书(KEGG) MIRNA 

分 类 号：R587.2[医药卫生—内分泌]