奥马珠单抗通过miR-217/E2F3轴介导SMAD3表达水平对大鼠支气管哮喘ASMCs增殖和迁移的影响及作用机制  

作　　者：赵艳梅[1] 闫萌 张振艳 张大彧 高秀兰 

机构地区：[1]济宁骨伤医院药剂科,山东济宁272000 [2]济宁医学院附属医院检验科 [3]济宁医学院附属医院药学部

出　　处：《中国老年学杂志》2025年第1期199-205,共7页Chinese Journal of Gerontology

摘　　要：目的 研究奥马珠单抗对大鼠支气管哮喘(BA)气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖、迁移的影响及作用机制。方法 将30只大鼠按随机数字法分为空白组(以等量生理盐水腹腔注射、雾化吸入,其余操作不变)、模型组(使用卵白蛋白致敏及雾化吸入法构建BA大鼠模型)、奥马珠单抗组[基于模型组,腹腔注射166 mg/(kg·d)奥马珠单抗]。苏木素-伊红(HE)染色观察支气管肺组织病理改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清免疫球蛋白(Ig)E水平;使用动物呼吸机检测吸气阻力、呼气阻力变化。取对数生长的ASMCs分为对照组(不处理)、血小板源生长因子(PDGF-BB)组(加入10 ng/ml PDGF-BB构建哮喘细胞模型)、PDGF-BB+奥马珠单抗组(基于PDGF-BB组,使用10μg/ml奥马珠单抗处理)、PDGF-BB+奥马珠单抗+miR-217 inhibitor组(基于PDGF-BB+奥马珠单抗组,转染miR-217 inhibitor)、PDGF-BB+奥马珠单抗+miR-217 inhibitor+E2F转录因子3抑制剂(si-E2F3)组(基于PDGF-BB+奥马珠单抗+miR-217 inhibitor组,转染siDNA3.1-E2F3)、NC mimic组(基于PDGF-BB组,转染NC mimic)、miR-217 mimic组(基于PDGF-BB组,转染miR-217 mimic)。5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-217、E2F3水平;双荧光素酶实验检测miR-217、E2F3之间的靶向关系;Western印迹检测E2F3蛋白表达水平;免疫荧光检测SMAD家族成员(SMAD)3水平。结果 对照组未见病理学改变,模型组出现炎症细胞浸润,气道平滑肌层和网明显增厚,奥马珠单抗组中上述组织病理学变化有所改善;模型组IgE、吸气阻力、呼气阻力较空白组明显升高(P<0.05),奥马珠单抗组IgE、吸气阻力、呼气阻力较模型组明显降低(P<0.05);E2F3是miR-217的靶向mRNA,miR-217 mimic组中E2F3 mRNA和蛋白水平较NC mimic组明显降低(P<0.05);PDGF-BB组ASMCs增殖率、迁移能力、E2F3水平较对照组明显升高,miR-217表达水平明显降低

关 键 词：支气管哮喘 奥马珠单抗 非编码微小RNA-217 E2F转录因子3 SMAD家族成员3 

分 类 号：R256.12[医药卫生—中医内科学]