登革病毒通用型核酸检测方法的建立及实验室污染风险初步评估  

Establishment of a universal nucleic acid detection method for dengue virus and a preliminary assessment of the risk of laboratory contamination

作　　者：阚乃鹏 高婷[1] 游丁浩[1] 王金章[1] KAN Naipeng;GAO Ting;YOU Dinghao

机构地区：[1]福建省疾病预防控制中心(福建省人兽共患病研究重点实验室),福建福州350012 [2]福建师范大学生命科学学院,福建福州350108

出　　处：《海峡预防医学杂志》2024年第5期54-57,共4页Strait Journal of Preventive Medicine

基　　金：福建省卫生健康科技计划项目(2020GGA024);福建省卫生健康青年科研课题(2020QNA021)。

摘　　要：目的建立登革病毒(DENV)通用型实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测方法,检测病原微生物实验室环境中DENV的污染状况,识别实验室内易发生污染的重点部位。方法根据DENV各血清型基因组保守序列,自行设计4个DENV血清型通用引物及探针,建立DENV通用型RT-qPCR检测方法并确定检出限和正确率,用病毒采样拭子对实验操作后的物表、常用仪器、实验室环境及个人防护用品表面进行采样,用所建立方法进行检测。结果该研究所建立的DENV通用型RT-qPCR检测方法对不同血清型的敏感性分别为:DENV-1:38.9拷贝/反应、DENV-2:45.75拷贝/反应、DENV-3:31.75拷贝/反应、DENV-4:24.5拷贝/反应;用上海某商用试剂盒品牌以临床标本进行特异性及重复性对照,两者结果一致,特异性及重复性良好;以该法评估实验室污染风险,发现实验后实验人员个人防护装备、核酸提取实验中相关仪器设备表面污染风险较高。结论该研究所建立DENV通用型RT-qPCR检测方法,准确度高,灵敏性较好,实验室污染风险初步评估结果,提示应重点关注核酸提取过程中的风险控制,需规范佩戴个人防护装备。

关 键 词：登革病毒 逆转录-聚合酶链反应 实验室污染 风险评估 个人防护 

分 类 号：R373.3[医药卫生—病原生物学]