立克次体多重荧光PCR检测方法的建立及初步应用  

作　　者：亚红祥[1] 董珊珊[1] 杨智明[1] 苏超[1] 

机构地区：[1]云南省地方病防治所(云南省自然疫源性疾病防控技术重点实验室),云南大理671000

出　　处：《海峡预防医学杂志》2024年第5期61-64,共4页Strait Journal of Preventive Medicine

基　　金：云南省重大科技专项(202102AA100019)。

摘　　要：目的建立立克次体多重荧光PCR检测方法并在不明原因发热患者中进行应用。方法根据恙虫病东方体(Ot)groEL基因、莫氏立克次体(Rm)ompB基因、斑点热立克次体(SFGR)ompA基因设计引物和探针,建立多重荧光PCR检测方法,与巢式PCR和血清学胶体金法在不明原因发热患者血液样本中应用并比较。结果立克次体多重荧光PCR检测方法对恙虫病东方体、莫氏立克次体、斑点热立克次体以外的34种病原体DNA进行特异性检测,结果均为阴性。灵敏性检测结果为10^(2)copies/μL。重复性检测结果Ct值变异系数在1.45%~1.47%。在不明原因发热患者中应用建立的多重荧光PCR方法并与血清学法和巢式PCR法比较:多重荧光PCR法检出Ot核酸阳性17份,同时经巢式PCR法检测12份为阳性、经血清法检测17份均为阳性;Rm、SFGR核酸检测均为阴性;多重荧光PCR法与巢式PCR法、胶体金法检测阳性结果符合率(Kappa值)分别为70.6%(0.79)、46.0%(0.47)。结论本文建立的多重荧光PCR法具有良好的特异性、灵敏性和可操作性,可应用于不明原因发热病人中进行立克次体筛查。

关 键 词：立克次体 多重荧光PCR 巢式PCR 鉴别诊断 发热患者 

分 类 号：R513[医药卫生—内科学] R376[医药卫生—临床医学]