心力衰竭合并肺部感染铜绿假单胞菌OprF蛋白的生物学功能及其原核表达  

作　　者：吴清 韩泉 张晋 

机构地区：[1]湖北省荣军医院老年医学科,湖北武汉430000 [2]武汉市红十字会医院全科

出　　处：《中国老年学杂志》2025年第4期984-987,共4页Chinese Journal of Gerontology

摘　　要：目的分析心力衰竭合并肺部感染铜绿假单胞菌外膜蛋白(Opr)F的生物学功能及其原核表达。方法由NCBI数据库获取OprF蛋白的基因组信息,分析OprF蛋白理化性质、跨膜结构、信号肽、二级与三级结构等生物学信息。提取心力衰竭合并肺部感染的铜绿假单胞菌基因组DNA,扩增OprF羧基端,构建重组表达载体pET28b-F。采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,采用Western印迹法进行鉴定。结果OprF基因编码蛋白分子量为37.64 kD,脂溶性指数为69.44,等电点为4.98,有多个酶切位点,OprF为亲水性蛋白。信号肽为1~24位氨基酸,OprF蛋白无跨膜结构。二级结构中α-螺旋氨基酸比例为30.45%,β-转角为10.58%,β-片层为26.75%,无规则卷曲为32.22%。OprF蛋白的三维空间结构为桶状结构。OprF蛋白B细胞优势表位区段:73~88、98~107及302~317。细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位为250~258位的SKVKENSYA及236~331位的PVADNATAE,OprF蛋白的优势Th抗原表位为46~54位的VRNMKNADL,53~59位的YGGSIGY,109~117位的LRPYVSAGL及303~312位的LVNEYGVEG。pET28b-F原核表达载体构建成功,诱导后表达外膜蛋白OprF。结论系统分析了心力衰竭合并肺部感染铜绿假单胞菌OprF蛋白的理化性质、跨膜结构、信号肽、二级与三级结构等生物学信息,同时成功筛选出特异性抗OprF单克隆抗体。

关 键 词：心力衰竭合并肺部感染 铜绿假单胞菌 外膜蛋白F 生物学功能 原核表达 抗原表位 

分 类 号：R541.6[医药卫生—心血管疾病] R563.1[医药卫生—内科学]