多重RT-PCR同时检测菊花B病毒、菊花R病毒和菊花矮化类病毒研究  

作　　者：王金玲 谢真 

机构地区：[1]山东省聊城市茌平区博平镇农业农村综合服务中心,山东聊城252100 [2]山东省聊城市茌平区农业农村局,山东聊城252100

出　　处：《科技经济导刊》2024年第5期37-45,共9页Technology and Economic Guide

摘　　要：为快速鉴定菊花病毒病种类以预防病毒病传播,根据菊花R病毒(chrysanthemum virus R, CVR)、菊花B病毒(chrysanthemum virus B, CVB)和菊花矮化类病毒(chrysanthemum stunt viroid,CSVd)的基因保守区域设计特异性引物,建立了能够同时检测这3种病毒的多重RT-PCR检测方法。确定了cDNA模板1μL,dNTPs(各2.5 mM)1μL,CVR正反向引物为0.2μM,CVB正反向引物为0.4μM,CSVd正反向引物为0.4μM,Taq DNA聚合酶1.25 U,10×PCR buffer 2.5μL,ddH2O补充总体系至25μL的PCR体系及94℃预变性3 min;94℃变性30 s,56℃退火30 s;72℃延伸1min45s,30个循环;72℃终延伸10min的PCR反应程序,为CVR、CVB和CSVd多重RT-PCR检测体系。该体系的建立,将有效提高CVR、CVB和CSVd的检测效率,节省检测成本,为菊花病毒病的早诊断、早预防、早防治奠定基础。

关 键 词：菊花 菊花B病毒 菊花R病毒 菊花矮化类病毒 RT-PCR 

分 类 号：S432.41[农业科学—植物病理学]