实时荧光定量TaqManRT-PCR检测番鸭呼肠孤病毒方法的建立以及初步应用  

作　　者：王一帆 刘湘 韦良孟[1] 张旭[1] 刘兆洁 刘文静 曾小辉 蔡广娣 熊金光 

机构地区：[1]山东农业大学动物科技学院,山东泰安271018 [2]广州达农生物科技有限公司,广州510665 [3]广东省华晟生物技术有限公司,广州511300 [4]华中农业大学动物科技学院,武汉430072

出　　处：《养禽与禽病防治》2025年第4期14-19,共6页Poultry Husbandry and Disease Control

基　　金：山东省科技成果转移转化补助(鲁渝科技协作)项目“国家级畜禽遗传资源-酉阳麻旺鸭健康养殖体系的构建及推广应用”(2022LYXZ009)。

摘　　要：研究旨在建立一种适用于番鸭呼肠孤病毒检测的实时荧光定量TaqMan RT-PCR技术。以番鸭呼肠孤病毒(Muscovy duck reovirus strain815-12 segmentS4)RNA为模板,建立检测番鸭呼肠孤病毒的实时荧光定量RT-PCR方法。制备含有上述MDRV目的片段的RNA作为标准品,以10倍比稀释的标准品建立标准曲线,测定敏感性。同时采用标准品检测该方法的批内和批间重复性,并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果:建立的实时荧光定量TaqManRT-PCR方法能在番鸭呼肠孤病毒RNA样本中检出荧光信号。最低检出量为9.46×10^(1)copies/μL,敏感性良好,是常规RT-PCR的1000倍;线性范围达11个数量级。该方法重复性良好,批内变异系数和批间变异系数均在1%以下。经试验证明该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于MDRV的临床鉴别诊断以及流行病学调查,有效阻止MDRV在鸭群间的传播。

关 键 词：番鸭呼肠孤病毒 实时荧光定量RT-PCR TAQMAN探针 

分 类 号：S855.3[农业科学—临床兽医学]