胞内细胞因子染色法检测抗原特异性T细胞免疫反应的方法学验证  

Methodological validation of intracellular cytokine staining for the detection of antigen-specific T cell immune responses

作　　者：陈凌 王永智 邱文娜 彭福中 吴宏斌 祝军 雷高新 CHEN Ling;WANG Yongzhi;QIU Wenna;PENG Fuzhong;WU Hongbin;ZHU Jun;LEI Gaoxin

机构地区：[1]江苏华泰疫苗工程技术研究有限公司,泰州225300

出　　处：《中国医药生物技术》2025年第2期200-204,共5页Chinese Medicinal Biotechnology

基　　金：泰州市科技支撑社会发展项目(SSF20210066)。

摘　　要：目的对胞内细胞因子染色法检测抗原特异性T细胞免疫反应的方法进行验证。方法以重组带状疱疹病毒gE蛋白为抗原免疫小鼠,取小鼠脾脏淋巴细胞,通过细胞表面抗原和细胞内细胞因子染色进行细胞免疫反应评价。从专属性、重复性、批间精密度、区间精密度、稳定性五个指标进行方法验证。结果无肽刺激条件下免疫组小鼠和PBS组小鼠细胞因子CD4^(+)TNF-α、CD4^(+)IFN-γ、CD4^(+)IL-2均不表达,肽库刺激条件下PBS组小鼠细胞因子CD4^(+)TNF-α、CD4^(+)IFN-γ、CD4^(+)IL-2不表达,但免疫组小鼠细胞因子CD4^(+)TNF-α、CD4^(+)IFN-γ、CD4^(+)IL-2阳性表达。重复性、区间精密度、批间精密度和稳定性考察结果的CV值均小于20%。结论方法有良好的专属性,重复性、批间精密度、区间精密度和稳定性均符合要求。

关 键 词：细胞免疫 胞内细胞因子染色 方法验证 

分 类 号：Q2-33[生物学—细胞生物学]