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机构地区:[1]湖北科技学院附属第二医院耳鼻喉科,湖北咸宁437100 [2]湖北科技学院附属第二医院口腔科,湖北咸宁437100 [3]武汉大学人民医院耳鼻喉科
出 处:《中国老年学杂志》2025年第6期1485-1490,共6页Chinese Journal of Gerontology
基 金:湖北科技学院校内培育科研项目资助(2021-22X16)。
摘 要:目的探讨刺五加注射液对顺铂诱导的HEI-OC1细胞自噬凋亡的影响及潜在的作用机制。方法取对数生长期的小鼠耳蜗毛细胞HEI-OC1,将细胞分为4组:对照组(正常培养的HEI-OC1细胞)、刺五加组(3μg/ml)、顺铂组(8μg/ml)、顺铂+刺五加组(8μg/ml+3μg/ml)。CCK-8法检测各组HEI-OC1细胞在0、24、48、72 h时的增殖情况;单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色检测细胞内自噬体情况;吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色检测细胞凋亡形态;流式细胞术检测各组HEI-OC1细胞凋亡;分光光度法检测各组HEI-OC1细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平;Western印迹检测自噬蛋白微管相关蛋白轻链(LC)3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、重组人自噬效应蛋白(Beclin)-1、P62,凋亡蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的半胱氨酸蛋白酶(Cleaved-caspase)-3及PTEN诱导假定激酶(PINK)1/E3泛素连接酶(Parkin)通路蛋白。结果与对照组、刺五加组比较,顺铂组HEI-OC1细胞在24、48、72 h时的OD450值、SOD水平、P62、Bcl-2、PINK1及Parkin蛋白相对表达量显著降低,MDC染色细胞荧光强度、呈黄色、橙色荧光的HEI-OC1细胞数目、细胞凋亡率、ROS、MDA、细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、Bax、Cleaved-caspase-3、线粒体融合蛋白(Mfn)2蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与顺铂组比较,顺铂+刺五加组HEI-OC1细胞在24、48、72 h时的OD450值、MDC染色细胞荧光强度、SOD水平、Bcl-2、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1、PINK1、Parkin蛋白相对表达量显著升高,呈黄色、橙色荧光的HEI-OC1细胞数目、细胞凋亡率、ROS水平、MDA水平、细胞中P62、Bax、Cleaved-caspase-3、Mfn2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论刺五加注射液可促进顺铂诱导的HEI-OC1细胞自噬,抑制细胞凋亡,增强细胞的抗氧化应激能力,该机制可能与激活PINK1/Parkin通路有关。
关 键 词:刺五加注射液 顺铂 PTEN诱导假定激酶1/E3泛素连接酶通路 自噬 细胞凋亡
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