GAP-43对G_oα的激活及其构象变化基础  

作　　者：张玲[1] 黄有国[1] 

机构地区：[1]中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室,北京100101

出　　处：《中国科学（C辑）》2002年第6期527-534,共8页Science in China(Series C)

基　　金：国家自然科学基金资助项目(批准号:39730130);中国科学院重大支持项目(批准号:KJ951-B1-609)

摘　　要：GAP-43和G0是富含于神经生长锥的膜外周蛋白.用碱抽提法从牛脑皮层获得了高纯度的GAP-43,同时在大肠杆菌表达系统中获得了高纯度的豆蔻酰化G0α.测定GAP-43对G0α结合35S-GTPγS活力影响的结果表明,GAP-43可显著促进G0α的GTPγS的结合活力,且呈浓度依赖性.用CaM-Sepharose亲和柱的实验结果表明GAP-43与G0α·GDP之间存在直接的相互作用.这种相互作用所引起的G0α的构象变化的测定结果显示,GAP-43使G0α·GDP的色氨酸内源荧光发射谱谱峰蓝移4 nm,其荧光强度增高35.3％,并使其HB的猝灭效率明显增加,其表观猝灭常数(Ksv)由(1.1±0.22)×105增至(4.1±0.43)×105M-1.而GAP-43对G0α·GTPγS无明显影响,表明GAP-43直接作用于G0α·GDP引起其构象变化,从而加速GDP的解离和GTPγS的结合,导致G0α的激活并启动G蛋白的循环实现信号的跨膜转导和放大.研究结果对阐明信号转导介导分子G蛋白在偶联受体和效应器之间的作用机理提供了有力的实验证据,对进一步深入揭示GDP和GTP的交换方式在G蛋白的循环中的关键作用提供了新的启示.

关 键 词：Goα 激活 GAP-43 GDP/GTP交换 构象 神经蛋白 神经生长维 结合活力 结合蛋白 

分 类 号：Q753[生物学—分子生物学]