表达人生长激素的逆转录病毒载体的构建  

Construction of retrovital vector expressing human growth hormone

作　　者：刘威[1] 曲元明[1] 

机构地区：[1]山东大学临床医学院山东省立医院,250021

出　　处：《广西医学》2003年第2期155-157,共3页Guangxi Medical Journal

基　　金：国家自然科学基金资助项目 (395 70 716 )

摘　　要：目的 :建立一个表达人生长激素 (h GH)的重组逆转录病毒载体基因转移系统 ,为下一步研究做准备工作。方法 :通过重组 DNA技术 ,用 Eco R 酶切载有人生长激素的质粒 p NMG3,获得约 3.9kb的小鼠金属硫蛋白启动子 (m MT- 1)和人生长激素 (h GH)基因片段 ,将其亚克隆至逆转录病毒表达载体 p L XSN中。对阳性重组子 p L XSNh GH进行酶切和 PCR鉴定。利用目的基因片段上的 Bg/ 和载体 p L XSN的多克隆位点中的 Bam H 酶切位点双酶切 ,正向重组子 p L XSNh GH+应能产生约 0 .8kb和 9.0 kb2个片段 ;同时 ,应用巢式 PCR鉴定目的片段 ,扩增片段大小为 1.119kb,与预期结果相符。结果 :表明人生长激素逆转录病毒表达载体构建成功。结论 :人生长激素逆转录病毒表达载体的构建成功为Objective:To established recombinant retroviral gene transfer system of expressing human growth hormone for futher study Methods:By means of recominant DNA techniques,a human growth and a mMT 1 3 9kb gene segment was cut from pNMG3/hGH with EcoR Ⅰ,with the targeting gene and through subcloning,it was inserted into the retrovirus expression vector pLXSN,positive vector was analyzed through digested with restriction enzyme and PCR,so the needed human growth expression vector,pLXSNhGH,was generated Results:hGH gene has been subcloned into retroviral vector pLXSN successfully Conclusion:This result suggested that it may be used for further investigation of growth hormone deficiency gene therapy

关 键 词：人生长激素基因 逆转录病毒载体 基因转移 

分 类 号：R335[医药卫生—人体生理学]