受NaCl诱导的盐藻果糖-1,6-二磷酸醛缩酶cDNA的克隆及其在烟草中的表达  

作　　者：张晓宁[1] 林长发[1] 王昊[1] 曲志才[1] 张宏伟[1] 姚剑虹[1] 沈大棱[1] 陈火英[2] 

机构地区：[1]复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室 [2]上海交通大学农学院

出　　处：《中国科学（C辑）》2002年第5期392-398,共7页Science in China(Series C)

基　　金：上海市教育发展基金会资助项目(批准号:98SG47)

摘　　要：采用快速扩增 cDNA末端（RACE）技术,获得了盐藻（Dunaliella salina）受诱导表达的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶全长CDNA（DsALDP）.蛋白质序列分析发现,DSALDP与许多植物叶绿体的果糖-1,6-二磷酸醛缩酶（AldP）具有较高的同源性（66％～73％）.系统进化分析进一步证明DsALDP与藻类的AldP亲缘关系最近.就表达谱而言,DsALDP是NaCl诱导下新表达的转录本,其表达水平随诱导时间的不同而呈显著变化.筛选的DsALDP cDNA构建到双元载体pBI121并导入农杆菌用以转化烟草,对4个T1代转基因植株进行Southern检测,证明DsALDP已整合入转基因植株的基因组.RT-PCR分析显示DsALDP在这些植株中均得到有效表达.生物测试表明,T1-1,T1-2和T1-3植株在100～200 mmol/L NaCl下仍保持醛缩酶活性,且其脯氨酸含量均有不同程度的升高.

关 键 词：盐藻 NaCl诱导 叶绿体果糖—1 6—二磷酸醛缩酶 耐盐性 土壤盐渍化 绿藻门 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]