一氧化氮和氧自由基诱导缺氧再给氧心肌细胞凋亡的bcl-2和p53信号通路研究  

作　　者：沈剑刚[1] 张德良[1] 忻文娟[1] 赵保路[1] 丘幸生[2] 姜泊[2] 冯戬云[3] 

机构地区：[1]中国科学院生物物理研究所脑与认知科学研究中心视觉信息加工开放研究实验室,北京100101 [2]第一军医大学中医系 [3]香港大学医学院内科学系医学物理科

出　　处：《中国科学（C辑）》2002年第5期436-446,共11页Science in China(Series C)

基　　金：国家自然科学基金(批准号:29935080);广东省自然科学基金资助项目

摘　　要：观察了心肌缺氧再给氧损伤的一氧化氮（nitric oxide,NO）和氧自由基机制.新生 Wistar大鼠心肌细胞置于95％N2/5％CO2环境培养24 h,然后置于95％O2/5％CO2环境培养4h造成缺氧再给氧心肌细胞损伤模型.单纯缺氧组心肌细胞置于95％N2/5％CO2环境培养24h,但不再给氧.NO供体硝普钠（SNP,5μmol/L）、NO合酶抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME,100μmol/L）和其异构体Nω-硝基-D-精氨酸甲酯（D-NAME,100μmol/L）以及超氧化物歧化酶/过氧化氢酶（SOD/CAT,各100U/mL）分别于缺氧前加入培养基.正常对照组心肌细胞置于95％空气/5％CO2环境下培养.结果显示,缺氧24h能增加培养介质中NO,NO2-/NO3-,硫代巴比妥酸反应产物（TBARS）和乳酸脱氢酶（LDH）水平,再给氧降低培养介质中NO和NO2-/NO3-水平,增加TBARS和LDH水平.缺氧上调bcl-2,p53和p21/wafl/cipl蛋白表达水平,而再给氧下调bcl-2蛋白表达水平,上调p53和p21/wafl/cipl蛋白表达水平.同时,缺氧增加心肌细胞凋亡率,而再给氧增加心肌细胞坏死率.NO供体硝普钠（SNP）增加培养介质中NO2-/NO3-和TBARS水平,下调bcl-2蛋白表达而上调p53和p21/wafl/cipl蛋白表达水平,增加DNA断裂、凋亡及坏死细胞率.L-NAM日和SOD/CAT分别降低培养介质中NO2-/NO3-和TBARS水平。

关 键 词：细胞凋亡 一氧化氮 氧自由基 BCL-2 p53 p21/waf1/cip1 心肌缺氧 

分 类 号：Q255[生物学—细胞生物学]