编码蚯蚓纤溶酶组分A基因的cDNA克隆及表达  

作　　者：刘俊峰[1] 王新泉[1] 徐磊[1] 张季平[1] 梁栋材[1] 常文瑞[1] 

机构地区：[1]中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室,北京100101

出　　处：《科学通报》2002年第22期1718-1721,共4页Chinese Science Bulletin

基　　金：国家自然科学基金(批准号:39970174);国家重点基础研究发展规划(批准号:G1999075601)资助项目.

摘　　要：蚯蚓纤溶酶组分A是赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)体内纤溶酶的主要组分之一,具有双重纤溶活性.用逆转录PCR(RT-PCR)的方法从赤子爱胜蚓中克隆了编码蚯蚓纤溶酶组分A的cDNA,由其推测的氨基酸序列与丝氨酸蛋白酶类胰蛋白酶家族的成员具有较高的同源性,而且具有其保守的催化位点,表明该蛋白质可能是胰蛋白酶家族的成员.将上述cDNA导入大肠杆菌的表达载体pQE31和pMAL-c2x,构建表达质粒pQE-efea和pMAL-efea,这2个表达质粒均可以在大肠杆菌菌株M15中诱导表达出与预期大小相近的重组蛋白.其中,pQE-efea表达的His6-EFEa主要以包涵体形式存在,而pMAL-efea表达的重组蛋白MBP-EFEa是可溶性的,并且具有纤溶活性.

关 键 词：蚯蚓纤溶酶 CDNA 原核表达 血管栓塞病 溶栓类药物 治疗 基因克隆 大肠杆菌 基因表达 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]