RT－PCR克隆里氏木霉甘露聚糖酶cDNA  

作　　者：王和平[1] 敖长金[2] 

机构地区：[1]内蒙古农业大学生物工程学院，呼和浩特010018 [2]内蒙古农业大学动物科学与医学学院，呼和浩特010018

出　　处：《Developmental and Reproductive Biology》2002年第4期276-282,共7页发育与生殖生物学报（英文版）

摘　　要：为了省去繁杂的mRNA提取纯化过程，简便，快速，重现性好的克隆里氏木霉RutC-30β-甘露聚糖酶cDNA，本研究依据其cDNA序列设计了一对引物F1和R1，然后用总RNA直接进行RT-PCR，其产物经过EcoRI,BamHI酶切后插入P^GEM-32克隆载体，再转化到JM109感受态细胞中，克隆转化子，酶切测序。结果获得了β-甘露聚糖酶编码的成熟肽cDNA，其序列与GenBank报道完全一样，另外，对有利于用RT-PCR克隆cDNA的高诱导产生β-甘露聚糖酶的里氏木霉RutC-30菌体培养条件进行了研究。

关 键 词：RT-PCR 克隆 里氏木霉 Β-甘露聚糖酶 CDNA 

分 类 号：Q949.32[生物学—植物学] Q75