尾静脉大容量快速注射法介导的人凝血因子Ⅸ基因在小鼠肝内的高效表达  

作　　者：贺晨霞[1] 冯登敏[1] 陈立[1] 陈浩明[1] 姚纪花[1] 沈琦[1] 卢大儒[1] 薛京伦[1] 吴文君 丁友法 

机构地区：[1]复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,上海200433 [2]第二军医大学附属长海医院内分泌科,上海200433 [3]浙江省丽水市医院,丽水323000

出　　处：《科学通报》2003年第5期447-451,共5页Chinese Science Bulletin

基　　金：国家"八六三"高技术研究发展计划(批准号:2001AA217181);国家自然科学基金(批准号:30100102);教育部优秀论文基金(批准号:199925);霍英东基金(批准号:71019);高等学校优秀青年教师奖励计划(批准号:JRAPOYT)资助项目.

摘　　要：尾静脉大容量快速注射裸质粒DNA能够介导外源基因在动物肝内高效表达,采用此方法将人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)表达质粒pCMV-hFⅨ2.2 mL于7 s内导入小鼠体内,hFⅨ在小鼠体内表达水平最高为2921 ng/mL(血浆).hFⅨ表达水平与裸质粒DNA注射剂量呈正相关,重复注射的hFⅨ表达水平偏低(最高1459 ng/mL).PCR检测发现小鼠多种器官中存在hFⅨ cDNA,RT-PCR和免疫组化切片检测表明,hFⅨmRNA和蛋白主要在肝脏中表达.转氨酶水平与病理切片检测表明,注射1 d后5％的肝脏细胞受到损伤,但在3～10 d内恢复.研究结果表明,尾静脉大容量快速注射法能够介导hFⅨ在小鼠体内高水平表达,为基因治疗研究提供了一项简便而实用的动物实验手段.

关 键 词：尾静脉大容量快速注射法 人凝血因子Ⅸ 基因转移 裸质粒 基因表达 基因治疗 血友病 

分 类 号：Q78[生物学—分子生物学]