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作 者:吕玉兵 赵颖 赵剑峰 代小虎[2] 仓怀兴[2] 王耀萍[2] 黄巨富
机构地区:[1]中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室,北京100093 [2]中国科学院生物物理研究所,北京100101
出 处:《Acta Botanica Sinica》2003年第3期289-294,共6页Acta Botanica Sinica(植物学报:英文版)
基 金:国家重点基础研究发展规划项目 ( 0 0 1CB10 89_0 6) ;国家载人航天工程 ( 92 1_2 );国家自然科学基金 ( 3 0 2 70 2 96)~~
摘 要:By using the liquid/liquid diffusion method at a suitable crystallization conditions, large single and dark brown crystals (the sides of the largest crystals were 0.20 mm x 0.20 mm x 0.07 min and 0.18 mm x 0.18 mm x 0.05 mm, respectively) could be obtained from the solutions of nitrogenase CrFe protein and MnFe protein purified from a mutant UW3 of Azotobacter vinelandii Lipmarm grown in Cr- or Mn-containing but NH3-free medium. The time of crystal formation, as well as the number, size, shape and quality of crystals obviously depended on the concentrations of PEG, MgCl2 and NaCl. The liquid/liquid diffusion method seems to benefit CrFe protein and MnFe protein for the growth of large single crystals for X-ray diffraction analysis.用液 /液扩散法 ,从分别含Cr和Mn的无氨培养基中生长的固氮菌 (AzotobactervinelandiiLipmann)突变种UW3 中纯化出的CrFe蛋白和MnFe蛋白 ,在合适的结晶条件下生长出深棕色大单晶 (最大晶体的尺寸分别为 0 .2 0mm× 0 .2 0mm× 0 .0 7mm和 0 .18mm× 0 .18mm× 0 .0 5mm)。PEG、MgCl2 和NaCl的浓度对这两种蛋白的出晶时间、晶核数目、晶体大小和形状都有明显影响。结果表明 ,用此结晶法有利于CrFe蛋白和MnFe蛋白生长出可供X_射线衍射分析的大单晶。
关 键 词:mutant UW3 of Azotobacter vinelandii nitrogenase CrFe protein and MnFe protein growth of large single crystals
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